Laserkonfokaalse mikroskoobi tööpõhimõte
Laserkonfokaalse mikroskoobi tööpõhimõte
Olympuse laserkonfokaalne mikroskoop on detektor, mis suudab koguda signaale. Selle tööpõhimõte seisneb selles, et punktvalgusallikas kuvatakse pärast fluorestsentsmikroskoobi läbimist suurendatud kohana, mida nimetatakse "õhukettaks". Tavalises valge valgusega interferomeetrilises konfokaalses mikroskoobis blokeeritakse fookustasandist väljapoole kiirgav valgus nööpnõelaga, mille suurus määrab, kui palju Airy kettast võib detektorisse siseneda. Mida väiksem on nõelaauk, seda teravam on saadud pilt ja seda hämaram on pilt, kuna suurem osa valgusest läheb kaduma. Mida väiksem on ava, seda parem on eraldusvõime, kuid jällegi, seda rohkem valgussignaali kaob. Olympuse laserkonfokaalne mikroskoop võib pakkuda üheaegselt nii värvilist CCD-pilti kui ka laserskaneerivat konfokaalset pilti. Olympuse konfokaalsed lasermikroskoobid on võimelised mõõtma kõrgust ühe valgusallika, ühe proovi ja ühe detektori konfokaalse seadistuse kaudu. Kui proov asub objektiiviläätse fookustasandil ja proovi pinnalt peegelduv laservalgus on fokuseeritud konfokaalsesse avasse, võtab fotodetektor signaali proovilt vastu. Kui proov on fookusest väljas, ei võta konfokaalne ava lasersignaali vastu, seega kogutakse ainult fookuses olev signaal. See funktsioon võimaldab realiseerida Olympuse laserkonfokaalse mikroskoobi optilise sektsiooni funktsiooni.
Konfokaalse lasermikroskoopia eelised
1. Kasutades valgusallikana laservalgust, skannitakse pärast vastavate fluorestseeruvate sondide märgistamist proovi punkt-punkti haaval, et saada kihthaaval kahemõõtmelised optilised ristlõikekujutised. Sellel on "raku CT" funktsioon ja seda saab toetada arvuti kolmemõõtmeline rekonstrueerimistarkvara, et saada kolmemõõtmelisi kujutisi, mida saab iga nurga all pöörata, et jälgida rakkude ja kudede kolmemõõtmelist kuju ja ruumilist seost;
2. See suudab jälgida elusrakke ja kudesid ilma kahjustusteta ning dünaamiliselt mõõta elusrakkude füsioloogilist teavet, nagu Ca ioonide kontsentratsioon ja pH väärtus rakkudes;
3. See võib mõõta rakumembraani voolavust, rakkudevahelist sidet, rakkude sulandumist, tsütoskeleti elastsust jne ning seda saab kasutada "kerge noana" rakusisese "operatsiooni" lõpetamiseks. See tehnoloogia võimaldab elusrakkude ja -kudede in situ dünaamilist ja kvantitatiivset jälgimist ja mõõtmist.
