Mis on faasikontrastmikroskoop
Faasikontrastmikroskoop on mikroskoop, mis suudab objekti valguse läbimisel tekkiva faasierinevuse (või optilise tee erinevuse) teisendada amplituudi (valguse intensiivsuse) muutuseks. Kasutatakse peamiselt elusrakkude, värvimata koelõikude või värvitud proovide vaatlemiseks, millel puudub kontrastsus.
Inimsilm suudab eristada ainult nähtava valguse lainepikkuse (värvi) ja amplituudi muutusi, kuid ei suuda eristada faasimuutusi. Enamik bioloogilisi proove on väga läbipaistvad ja valguslainete amplituud jääb pärast läbimist põhimõtteliselt muutumatuks, ainult faasimuutused.
Faasikontrastmikroskoop muudab põhimõtteliselt proovi läbiva nähtava valguse optilise tee erinevuse amplituudide erinevuseks, parandades seeläbi erinevate struktuuride kontrasti ning muutes need selgeks ja nähtavaks. Valgus murdub läbi katsekeha, kaldudes kõrvale algsest valgusteest ja hilinedes 1/4 λ (lainepikkuse) võrra, kui seda veelgi suurendada või vähendada 1/4 λ, siis optilise tee erinevus muutub 1/2 λ. kaks fotosünteesitelge tugevnevad ja amplituud suureneb või väheneb, suurendades kontrasti.
Struktuurilisest vaatenurgast seisneb erinevus faasikontrastmikroskoopia ja tavalise optilise mikroskoopia vahel järgmises:
1. Rõngakujuline ava Ringikujulise avaga diafragma, mis on paigaldatud valgusallika ja kondensaatori vahele, moodustamaks kondensaatorit läbiva valguse õõnsa koonuse ja fokuseerides selle proovile.
2. Faasierinevusmikroskoobis on objektiivi sisse lisatud magneesiumfluoriidiga kaetud faasiplaat, mis viivitab otsese või hajutatud valguse faasi 1/4 λ võrra. Faasiplaadil on kaks piirkonda, seda osa, kust läbib otsest valgust, nimetatakse "konjugeeritud pinnaks" ja seda osa, mida läbib difrakteeritud valgus, nimetatakse "kompensatsioonipinnaks". Faasiplaat jaguneb tööefekti järgi kahte tüüpi:
(1) Plussfaasiplaat: viivitage otsevalgust 1/4 λ võrra, pärast kahe valguslainete komplekti kombinatsiooni valguslainete amplituud suureneb ja proovi struktuur muutub ümbritsevast keskkonnast heledamaks, moodustades ereda kontrasti. (tuntud ka kui negatiivne kontrast).
(2) B pluss faasiplaat: difraktsioonivalguse edasilükkamine 1/4 λ võrra. Pärast kahe valguskiirte komplekti ühinemist valguslained lahutavad ja amplituud väheneb, mille tulemuseks on ümbritsevast keskkonnast tumedam proovi struktuur, mis moodustab tumeda kontrasti (tuntud ka kui positiivne kontrast). Faasiplaadiga objektiivi nimetatakse faasikontrastobjektiiviks ja objektiivi väliskesta peal kasutatakse sageli sõna "Ph".
