Mis vahe on faasikontrastmikroskoopide ja tavaliste mikroskoopide vahel?
Faasikontrastmikroskoopia on spetsiaalne mikroskoop, mis muudab valguse läbipaistva proovi detailide läbimisel tekkiva optilise tee erinevuse (st faaside erinevuse) valguse intensiivsuse erinevuseks.
Kui valgus läbib suhteliselt läbipaistvat katsekeha, siis valguse lainepikkuses (värvis) ja amplituudis (heleduses) ilmset muutust ei toimu. Seetõttu on tavalise optilise mikroskoobiga värvimata proove (näiteks elusrakke) vaadeldes selle morfoloogiat ja sisemist struktuuri sageli raske eristada. Kuid raku erinevate osade murdumisnäitaja ja paksuse erinevuste tõttu on valguse läbimisel seda näidist otsese valguse ja hajutatud valguse optilise tee pikkused erinevad. Optilise tee pikkuse suurenedes või vähenedes muutub kiirenevate või mahajäävate valguslainete faas (tekitab faasierinevuse). Valguse faasierinevust palja silmaga ei tunneta, kuid faasikontrastmikroskoobis saab kasutada oma spetsiaalset seadet – rõngakujulist diafragmat ja faasiplaati, et kasutada valguse interferentsi fenomeni valguse faasierinevuse teisendamiseks amplituudierinevuseks (valgus ja tume), mida inimsilm tuvastab. erinevus), nii et originaalsel läbipaistval objektil on selged erinevused valguses ja pimeduses ning kontrast on suurenenud, võimaldades meil selgemalt jälgida elusrakke ja rakusiseseid komponente, mida ei saa näha või ei saa selgelt näha tavaliste optiliste mikroskoobide ja pimeda väljaga. mikroskoobid. teatud mikrostruktuurid.
Faaskontrastmikroskoobi pildistamise põhimõte: mikroskoopilise uurimise valgusallikas võib läbida ainult rõngakujulise diafragma läbipaistva rõnga ja seejärel kondensaatori abil kondenseerida valguskiire. Kui see valguskiir läbib kontrollitavat objekti, on valgus iga osa erineva optilise teepikkuse tõttu erinev. läbipainde aste (difraktsioon). Kuna läbipaistva rõnga moodustatud kujutis langeb kokku objektiivi tagumise fookustasandi ja faasiplaadi konjugeeritud tasapinnaga. Seetõttu läbib kallutamata otsevalgus konjugaadi pinda, samal ajal kui kõrvalekalduv hajutatud valgus läbib kompensatsioonipinda. Konjugaadi pinna ja faasiplaadi kompensatsioonipinna erinevate omaduste tõttu tekitavad need vastavalt neid kahte osa läbiva valguse faaside erinevuse ja intensiivsuse nõrgenemise. Seejärel ühendab tagumine lääts kaks valguskomplekti ja naasevad samale optilisele teele. Reisimisel segavad otsene valgus ja hajutatud valgus üksteist, muutes faasierinevuse amplituudide erinevuseks. Nii muudab faasikontrastmikroskoopia käigus värvitut läbipaistvat keha läbiv valgus inimsilmale eristamatu faasierinevuse amplituudierinevuseks (valguse ja pimeduse erinevuseks), mida inimsilm suudab eristada.
