Kaks mikroskoopide jaoks tavaliselt kasutatavat vaatlusmeetodit
1, Tumevälja vaatlus
Tume vaateväli on tegelikult tumeda välja valgustus Selle omadused erinevad eredast vaateväljast, kuna see ei vaatle otseselt valgustavat valgust, vaid pigem vaatleb kontrollitava objekti peegeldunud või hajunud valgust Seetõttu muutub vaateväli tumedaks taustaks, samal ajal kui vaadeldav objekt esitab ereda pildi
Tumevälja põhimõte põhineb optilisel Tyndalli fenomenil, kus tugeva valguse difraktsiooni tõttu ei saa inimsilm tugeva valgusega kokku puutudes tolmuosakesi märgata. Kui valgus projitseeritakse sellele viltu, siis paistab osakeste maht valguse peegeldumise tõttu suurenevat, muutes need inimsilmale nähtavaks.
Tumevälja vaatlemiseks vajalik spetsiaalne lisaseade on tumevälja prožektor, mille tunnuseks on see, et see ei lase valguskiirt läbi objekti alt üles, vaid muudab valguse liikumisteed kaldu objekti poole, nii et valgustusvalgus ei satuks otse objektiivi ning kasutab eredat pilti, mille moodustab peegeldus või difraktsioonvalgus, kui vaatlusväli tume objekti pinnal on vaatlusväljas palju suurem eraldusvõime. ulatudes 0,02-0,004-ni
2, faasikontrastpeegli kontrollimise meetod
Edukas faasikontrastmikroskoopia leiutamine optiliste mikroskoopide väljatöötamisel on tänapäeva mikroskoopiatehnoloogia oluline saavutus. Teame, et inimsilm suudab eristada ainult valguslainete lainepikkust (värvi) ja amplituudi (heledust). Värvitute ja läbipaistvate bioloogiliste proovide puhul ei muutu valguse läbimisel lainepikkus ja amplituud kuigi palju, mistõttu on raske eredas väljas katsekeha vaadelda.
Faasikontrastmikroskoop kasutab peegli kontrollimiseks kontrollitava objekti optilise tee pikkuse erinevust, kasutades tõhusalt valguse interferentsi nähtust, et muuta faasierinevus, mida inimsilm ei suuda eristada, eristatavaks amplituudide erinevuseks. Isegi värvitud ja läbipaistvad ained võivad muutuda selgelt nähtavaks. See hõlbustab oluliselt elusrakkude jälgimist, seetõttu kasutatakse pöörmikroskoopides laialdaselt faasikontrastmikroskoopiat
Faasikontrastmikroskoopia põhiprintsiip on muuta proovi läbiva nähtava valguse optilise tee erinevus amplituudide erinevuseks, parandades seeläbi kontrasti erinevate struktuuride vahel ning muutes need selgeks ja nähtavaks. Pärast proovi läbimist valgus läbib murdumise, kaldudes kõrvale algsest optilisest rajast ja hilinedes 1/4 λ (lainepikkus) võrra. Kui optilise tee erinevust suurendatakse või vähendatakse veel 1/4 λ võrra, muutub optilise tee erinevus 1/2 λ ja pärast telje ühendamist kahe valguskiire vaheline interferents suureneb või väheneb, parandades kontrasti.
1. Rõngakujuline diafragma asub valgusallika ja kondensaatori vahel ning selle ülesanne on moodustada õõnes valguskoonus, mis läbib kondensaatorit ja keskendub proovile.
2. Nurkfaasiline plaat: objektiivile lisatakse magneesiumfluoriidiga kaetud faasiplaat, mis võib otsese või hajutatud valguse faasi edasi lükata 1/4 λ võrra. Selle võib jagada kahte tüüpi:
(1) . A+faasi plaat: viivitage otsevalgust 1/4 λ võrra ja lisage kaks valguslainete komplekti pärast telgede ühendamist. Amplituud suureneb ja proovi struktuur muutub ümbritsevast keskkonnast heledamaks, moodustades ereda kontrasti (või negatiivse kontrasti)
(2) . B+faasiplaat: viivitage hajutatud valgust 1/4 λ võrra ja lahutage valguslained pärast kahe valguskiirte komplekti telgede kombineerimist, mille tulemuseks on amplituudi vähenemine ja tumeda kontrasti (või positiivse kontrasti) moodustumine. Struktuur muutub ümbritsevast keskkonnast tumedamaks
