Kaks levinud mikroskoobi vaatlusmeetodit
1. Tumevälja vaatlus
Tumevälja vaatlus kasutab pimeda välja valgustust. Erinevalt ereda välja vaatlusest ei vaadelda valgustavat valgust otse; tuvastatakse ainult proovilt peegeldunud või hajunud valgus. Selle tulemusena on vaateväljal tume taust, samal ajal kui proov paistab hele.
Tumevälja vaatlus põhineb Tyndalli efektil optikas. Tolmuosakesed on valguse difraktsiooni tõttu inimsilmale nähtamatud otsese intensiivse valguse all. Kui valgus tabab osakesi kaldu, muudab valguse peegeldus osakesed suuremaks ja nähtavaks.
Tumevälja vaatlemiseks vajalik spetsiaalne tarvik on pimeda välja kondensaator. See ei lase valguskiirel läbi proovi vertikaalselt ülespoole liikuda. Selle asemel suunab see valguse ümber, et valgustada proovi kaldnurga all. Valgusvalgus ei sisene otse objektiiviläätsesse ning eredad kujutised moodustuvad proovi pinnalt peegeldunud ja hajutatud valguse mõjul. Tumevälja vaatluse eraldusvõime on palju kõrgem kui heleda välja vaatluse oma, ulatudes 0, 02–0, 004 μm-ni.
2. Faaskontrastmikroskoopia
Optiliste mikroskoopide väljatöötamisel on faasikontrastmikroskoopia leiutamine kaasaegse mikroskoopia suur saavutus. Inimsilm suudab eristada ainult valguslainete lainepikkust (värvi) ja amplituudi (heledust). Värvitute ja läbipaistvate bioloogiliste proovide puhul läbib valgus vähese lainepikkuse või amplituudi muutumisega, mistõttu on ereda välja tingimustes neid raske jälgida.
Faaskontrastmikroskoopia teostab kontrolli, mis põhineb proovi optilise tee erinevusel. See kasutab tõhusalt valguse interferentsi, et muuta faasierinevused (inimsilmale nähtamatud) eristatavateks amplituudierinevusteks. Isegi värvituid läbipaistvaid aineid saab selgelt visualiseerida. See hõlbustab oluliselt elusrakkude jälgimist, nii et faasikontrastmikroskoopiat kasutatakse laialdaselt pöördmikroskoopidega.
Faaskontrastmikroskoobi põhiprintsiibiks on muuta läbi proovi läbiva nähtava valguse optilise tee erinevus amplituudide erinevuseks, parandades seeläbi erinevate struktuuride kontrasti ja muutes need selgelt nähtavaks. Pärast proovi läbimist valgus murdub, kaldub kõrvale oma algsest rajast ja pidurdub 1/4 lainepikkusest. Täiendav pidurdus või edasiminek 1/4 lainepikkusest annab optilise tee koguerinevuse 1/2 lainepikkust. Kaks kiirt asetsevad üksteise peale ja segavad, suurendades või vähendades amplituudi kontrasti suurendamiseks. Struktuurselt on faasikontrastmikroskoobil kaks eripära, mis eristavad seda tavalistest optilistest mikroskoopidest.
