Erinevus fluorestsentsmikroskoobi ja tavalise mikroskoobi vahel
Hiljuti proovisin teha hiirtest külmutatud lõike ja seejärel fluorestsentsmikroskoobiga, et näha, kas minu süstitud viirus on ajupiirkonnas, mida soovisin. Mõned fluorestsentsmikroskoopia põhiprintsiibid on vaja lühidalt selgeks õppida ja ma jagan neid siin.
Fluorestsentsmikroskoop kasutab ultraviolettvalgust valgusallikana, et kiiritada kontrollitavat objekti, nii et objekt kiirgab valgust, ja seejärel vaadelda objekti mikroskoobi all. Seda kasutatakse peamiselt immunofluorestsentsrakkude jaoks. See koosneb peamiselt valgusallikast, filtriplaadisüsteemist ja optilisest süsteemist, mis võimaldab vaadelda proovi fluorestseeruvat kujutist okulaari ja objektiiviläätse suurenduse kaudu. Vaatame, mis vahe on sellel fluorestsentsmikroskoobil ja tavalisel optilisel mikroskoobil.
1. Valgusmeetodite osas
Fluorestsentsmikroskoobi valgustusmeetod on üldiselt episkoopiline, see tähendab, et valgusallikas projitseeritakse uuritavale proovile läbi objektiivi.
2. Lahutusvõime poolest
Fluorestsentsmikroskoobid kasutavad valgusallikana ultraviolettvalgust. Lainepikkus on suhteliselt lühike, kuid eraldusvõime kõrgem kui tavalistel optilistel mikroskoopidel.
3. Filtri erinevus
Fluorestsentsmikroskoobis kasutatakse kahte spetsiaalset filtrit, mida kasutatakse valgusallika ees nähtava valguse välja filtreerimiseks ning objektiivi ja okulaari vahel ultraviolettvalguse välja filtreerimiseks, mis võib kaitsta inimese silmi.
Fluorestsentsmikroskoop on ka omamoodi optiline mikroskoop, peamiselt seetõttu, et fluorestsentsmikroskoobiga ergastav lainepikkus on lühike, mistõttu fluorestsentsmikroskoobi ja tavalise mikroskoobi struktuur ja kasutus erinevad. Enamikul fluorestsentsmikroskoopidel on hea funktsioon nõrga valguse hõivamiseks, nii et äärmiselt nõrga fluorestsentsi korral on selle pildistamisvõime samuti hea. Koos fluorestsentsmikroskoopide pideva täiustamisega viimastel aastatel on müra ka oluliselt vähenenud. Seetõttu kasutatakse üha enam fluorestsentsmikroskoope.
