Multifotoonsete laserskaneerivate mikroskoopide tugevused ja piirangud
Eelised on järgmised:
1. Punase või infrapunavalguse poolt ergastatud valguse hajumine on väike (väikeste osakeste hajumine on pöördvõrdeline lainepikkuse neljanda astmega).
2. Pole vaja nööpnõelasid, mis suudavad koguda rohkem hajutatud footoneid kujutise ristlõikest-.
3. Nõelaugud ei suuda eristada hajutatud footoneid, mis kiirguvad defokuseeritud või fookusaladelt ning multifotonitel on süvapildistamisel parem signaali-/-müra suhe.
4. Ühe footoni ergastamiseks kasutatav ultraviolett- või nähtav valgus neeldub ja nõrgeneb proovis kergesti enne, kui kiir jõuab fookustasandini, mistõttu on sügavate kihtide ergastamine raskendatud.
5. Bioloogilise mikroskoopia vaatluse puhul on esmatähtis mitte kahjustada organismi enda aktiivset seisundit ning säilitada veeringlus, ioonide kontsentratsioon, hapniku ja toitainete ringlus. Valgusvaatluse valdkonnas peab nii soojus- kui footonienergia jääma kiirgusdoosi piiresse ja valgusenergia, mis ei kahjusta rakke.
6. Mitmefotonmikroskoopial on ka palju eeliseid. Kolmemõõtmelise eraldusvõime, sügavusinvasiooni, hajumise tõhususe, taustvalguse, signaali-/-müra suhte, juhtimise jms osas on lasermikroskoopidel võrreldamatud või paremad omadused, mida varasematel lasermikroskoopidel ei olnud.
Mitmefotoni konfokaalne laserskaneeriv mikroskoop on laiendatud erinevatele uurimis- ja rakendusvaldkondadele. See suudab teostada kolme{0}}mittepurustavat vaatlust nende loomulikus olekus olevate proovide puhul ning parandada süsteemi eraldusvõimet ja signaali-/-müra suhet. Kasutades materjali omaduste muutusi pärast mitmefotoni ergastamist}}kolme{4{4} kõrguse andmete salvestamist. Samuti on võimalik saavutada igas suunas kolmedimensiooniline mikrotootmine, millel on kõrge rakendusväärtus. Võib arvata, et mitmefotoonse konfokaalse mikroskoopiaga seotud mehaaniliste, materjalide ja lasertehnoloogiate edasiarendamisel on multifotoonse konfokaalse laserskaneeriva mikroskoopia areng ja laiemad rakendused.
Puudused on järgmised:
1. Ainult fluorestsentskuvamiseks.
2. Kui proov sisaldab kromofoore, mis võivad neelata ergastavat valgust, näiteks pigmendid, võib proov saada termiliselt kahjustada.
3. Eraldusvõime on veidi vähenenud, kuigi seda saab parandada, kasutades samaaegselt konfokaalseid väikseid auke, tekib signaali kadu.
4. Kallite ülikiirete laserite piirangute tõttu on multifotoni skaneerivate mikroskoopide hind suhteliselt kõrge.
