Levinud vaatlusmeetodid optiliste mikroskoopidega kasutamiseks
Valgusmikroskoop on optiline instrument, mis kasutab valgust allikana, et suurendada ja jälgida pisikesi palja silmaga nähtamatuid struktuure. *Esimese mikroskoobi valmistas optik 1604. aastal.
Viimase kahe aastakümne jooksul on teadlased avastanud, et optilisi mikroskoope saab kasutada objektide tuvastamiseks, jälgimiseks ja pildistamiseks, mis on väiksemad kui pool tavapärase nähtava valguse lainepikkusest ehk paarsada nanomeetrit.
Kuna optilisi mikroskoope ei ole traditsiooniliselt nanoskaala uurimiseks kasutatud, puuduvad neil sageli kalibreeritud võrdlused standarditega, et kontrollida, kas tulemused on sellel skaalal täpse teabe jaoks õiged. Mikroskoop võib** järjekindlalt näidata üksiku molekuli või nanoosakese sama asukohta. Kuid samal ajal võib see olla väga ebatäpne ja mikroskoobiga tuvastatud objekti asukoht meetri miljardi täpsusega võib tegelikult olla miljondik meetrist, sest viga pole.
Optilised mikroskoobid on laboriseadmetes levinud ja võimaldavad hõlpsasti suurendada erinevaid proove, alates õrnadest bioloogilistest proovidest kuni elektriliste ja mehaaniliste seadmeteni. Samamoodi muutuvad optilised mikroskoobid üha võimekamaks ja taskukohasemaks, kuna need ühendavad teie nutitelefoni tuled videokaamera teadusliku versiooniga.
Levinud vaatlusmeetodid optiliste mikroskoopide jaoks
Diferentsiaalhäirete (DIC) vaatlusmeetod
Põhimõte
Polariseeritud valgus purustatakse spetsiaalse prisma abil üksteisega risti asetsevateks võrdse intensiivsusega kiirteks. Kiired läbivad uuritavat objekti kahes äärmiselt lähedal asuvas punktis (mikroskoobi eraldusvõimest väiksemad), erinedes seega veidi faasiliselt, andes pildile stereoskoopilise kolmemõõtmelise tunde.
Funktsioonid
Oskab panna uuritavat objekti tekitama kolmemõõtmelise kolmemõõtmelise tunde vaatlusefekt on intuitiivsem. Spetsiaalset objektiivi pole vaja ja see töötab paremini fluorestsentsi vaatlusega, mis suudab ideaalse efekti saavutamiseks reguleerida tausta ja objekti värvimuutust.
Tumevälja vaatlusmeetod
Tume väli on tegelikult tumeda välja valgustus. Selle omadused erinevad eredast väljast selle poolest, et see ei vaatle otseselt valgustatud valgust, vaid pigem uuritavast objektist peegelduvat või sellest difrakteerunud valgust. Selle tulemusena on vaateväli tume taust, samal ajal kui uuritav objekt annab ereda pildi.
Tumeda vaatevälja põhimõte põhineb Tyndalli fenomenil optikas, mille puhul peentolmu ei saa inimsilm seda läbiva tugeva otsevalguse juures märgata, kuna sellest möödub tugev valgus. Kui valgus suunata sellele viltu, siis osakesed justkui suurenevad ja muutuvad valguse peegeldumise tõttu inimsilmale nähtavaks. Tumevälja vaatlemiseks vajalik spetsiaalne tarvik on tumevälja täpistik. Seda iseloomustab see, et valguskiir ei lase läbi uuritava objekti alt üles, vaid valguse tee muutmine nii, et see oleks suunatud uuritava objekti poole kaldu, nii et valgusvihk ei satuks otse objektiivi. lääts ja hele kujutis moodustub uuritava objekti pinnalt peegeldunud või hajunud valguse abil. Tumevälja vaatluse eraldusvõime on palju kõrgem kui heledas väljas, ulatudes 0.02-0,004 μm-ni.
