Laserskaneeriva konfokaalse mikroskoobi rakendused bioloogias
① Seda saab rakendada peaaegu kõigis rakuuuringute valdkondades, sealhulgas rakubioloogias, rakufüsioloogias, neurobioloogias ja neurofüsioloogias.
② See võimaldab mitteinvasiivset reaalajas jälgida ja analüüsida elusrakke kombineeritud morfoloogiliste ja funktsionaalsete uuringute jaoks. Rakkude tuvastamine on mitteinvasiivne, ohutu, usaldusväärne ja väga korratav. Andmeid ja pilte saab kiiresti väljastada või pikaajaliseks säilitamiseks salvestada.
③ Ühe raku, rakurühmade või lokaalselt vaadeldavate kudede peened 2D- ja 3D-kihistruktuuride saamiseks võib läbi viia elusrakkude, kudede või rakukoelõikude pideva optilise sektsiooni skaneerimise. Nende hulka kuuluvad rakuspetsiifilised struktuurid, nagu tsütoskeletid, kromosoomid, organellid, rakumembraanisüsteemid ja proovide süvastruktuurid, aga ka terviklikud kolmemõõtmelised kujutised. Neljamõõtmelisi pilte saab hankida aja jooksul toimuvaid muutusi analüüsides. Mitmemõõtmelise pildistamise teostamiseks võib saada ka pilte, mis varieeruvad sõltuvalt fluorestsentsi lainepikkusest. See võimaldab koerakkude ja muude sihtstruktuuride ülitäpset ruumilist lokaliseerimist, toetades reaalajas dünaamilist vaatlust, analüüsi ja salvestamist kvalitatiivse, kvantitatiivse, ajapõhise ja positsioonilise jaotuse analüüsi jaoks.
④ Rakuliste biomaterjalide vaatlemine elusrakkudes või fluorestsentssondidega märgistatud viilutatud proovides, sealhulgas membraani märgistamine, rakkude jälgimine, sihtained, biokeemilised reaktsioonid, retseptorid või ligandid, nukleiinhapped jne. Samal proovil saab märgistada ja samaaegselt jälgida mitut ainet.
⑤ Intratsellulaarsete ioonide fluorestsentsmärgistamine ühe või mitme märgistusega. See tuvastab intratsellulaarsete ioonide (nt pH, naatriumi, kaaliumi, kaltsiumi ja magneesiumi) kontsentratsioonide suhte ja dünaamilised muutused.
⑥ Rakumembraani potentsiaali mõõtmine, vabade radikaalide tuvastamine jne.
⑦ Tehke ülitäpsed FRAP-i (fluorestsentsi taastumine pärast fotopleegitamist) katsed. Koos fluorestsentsi kadumisega fotovalgenduse katsetes kasutatakse seda raku-raku kommunikatsiooni ja rakusiseste molekulide liikumise uurimiseks. Aja-skaneerimise ja fotovalgenduse (fotodestruktsiooni) katsetes saab iga kanali andmeid ja pilte sünkroonselt väljastada ja teisendada. FRET (Förster Resonance Energy Transfer) katseid saab läbi viia, et uurida rakusiseste molekulide ja ioonide liikumist ja interaktsiooni fluorestsentsi lainepikkuse muutuste kaudu.
⑧ Sellel on kõrge täpsus (ruumiline lokaliseerimine, kvantifitseerimine, lainepikkuse eraldusvõime, aja eraldusvõime), kõrge tundlikkus ja kiire reageerimine. See suudab eraldada, vaadelda ja analüüsida mitme fluorestsentsmärgisega rakukudesid samas ajaaknas, isegi mitme fluorofoori puhul, millel on väga lähedased emissiooni lainepikkused (vahe vaid mitu nanomeetrit). Samuti pakub see veebipõhiseid mõõtmis- ja analüüsifunktsioone, näiteks mitme fluorestsentsmärgiste ühislokatsioonianalüüsi.
