Wprowadzenie do zalet i wad wielofotonowej mikroskopii skaningowej laserowej
Multifotoonse laserskaneerimise mikroskoobi eelised:
1. punase või infrapunavalguse tõttu ergastatud, valguse hajumine on väike ja väikeste osakeste hajumine on pöördvõrdeline lainepikkuse neljanda võimsusega.
2.
3. Nöörid ei erista hajutatud footonit, mis eralduvad defookustatud või fookuspiirkondadest, ja multipaaridel on sügava pildistamise korral parem signaali ja müra suhe.
4. Ühe footoni ergutamiseks kasutatav ultraviolett või nähtav valgus imendub ja summutab proov enne tala fookustasapinnale jõudmist, muutes sügavate kihtide ergutamise keeruliseks.
5. Bioloogilise mikroskoopia vaatluse osas on esimene kaalutlus mitte kahjustada organismi enda aktiivset olekut, säilitada vee, ioonide kontsentratsiooni, hapniku ja toitainete ringlus. Valguse vaatluse valdkonnas peavad nii soojus- kui ka footonienergia jääma kiiritusdoosi ja valguse energia alla, mis ei kahjusta rakke.
6. multifotoonmikroskoopial on palju eeliseid. Kolmemõõtmelise eraldusvõime, sügavuse sissetungi, hajumise efektiivsuse, taustvalgustuse, signaali ja müra suhte, kontrolli jms osas on omadusi, mida varasematel laser-mikroskoopidel pole või ei saa ületada
Multifotoonse laserskaneerimise mikroskoobi puudused:
1. Ainult fluorestsentskujutise jaoks.
2. Kui proov sisaldab kromofoore, mis võivad erutusvalgust imada, võib proovi tekkida termilistele kahjustustele.
3. Eraldusvõime on pisut vähenenud, ehkki seda saab parandada konfokaalsete väikeste aukude abil samaaegselt, on signaali kadu.
4. Kallide ultrafastiliste laserite piirangute tõttu on mitmekontrolli skaneerivate mikroskoopide kulud suhteliselt kõrged.
