Miks ma vajan konfokaalset mikroskoopi?
1. Optiline mikroskoop on täiustatud meie suurte eelkäijate pingutuste ja täiustustega. Tegelikult annab tavaline mikroskoop meile lihtsalt ja kiiresti ilusaid mikroskoopilisi pilte. Sündmus, mis muutis peaaegu täiuslike mikroskoopide maailma, oli aga "laserskaneeriva konfokaalse mikroskoobi" leiutamine. Seda uut tüüpi mikroskoopi iseloomustab optiline süsteem, mis eraldab pildiinfot ainult pinnalt, millele fookus on kontsentreeritud ning fookust muutes samal ajal omandatud informatsiooni pildimällu taastades on võimalik saada terav pilt täielik 3-mõõtmeteave. Nii on võimalik hõlpsasti saada teavet pinna kuju kohta, mida tavapärase mikroskoobiga kinnitada ei saa. Lisaks, kuigi "lahutusvõime suurendamine" ja "teravustamise sügavuse suurendamine" on tavapäraste optiliste mikroskoopide jaoks vastuolulised tingimused, eriti suure suurenduse korral, lahendatakse see probleem konfokaalsete mikroskoopidega.
2. Konfokaalse optilise süsteemi eelised
Konfokaalne optiline süsteem on proovi punktvalgustus, samas kui peegeldunud valgus võetakse vastu ka punktretseptori abil. Kui proov asetatakse fookuspunkti, jõuab peaaegu kogu peegeldunud valgus fotoretseptorini ja kui proov on fookusest väljas, ei jõua peegeldunud valgus fotoretseptorisse. Teisisõnu, konfokaalses optilises süsteemis väljastatakse ainult fookuspunktiga kattuv pilt ning laigud ja kasutu hajutatud valgus blokeeritakse.
3. Miks kasutada laserit?
Konfokaalses optilises süsteemis valgustatakse näidist mingis punktis ja peegeldunud valgust võtab vastu punktsensor. Seetõttu on vajalik punktvalgusallikas. Laserid on väga punktvalgusallikad. Enamasti on konfokaalsete mikroskoopide valgusallikaks laservalgusallikas. Lisaks on laserite monokromaatilisus, suundumus ja suurepärane kiire kuju nende laialdase kasutuselevõtu olulised põhjused.
4. Võimalik on kiirel skaneerimisel põhinev reaalajas vaatlus.
Laserskaneerimisel kasutatakse horisontaalsuunas akustilist optilist kõrvalekaldeseadet (Acoustic Optical Deflector, AO prime) ja vertikaalsuunas servoelektroonilist juhitava kiirega skaneerivat peeglit (Servo Galvano-peegel). Kuna AO deflektoris puudub mehaaniline vibratsioon, on võimalik kiire skaneerimine ja võimalik on jälgida reaalajas monitori ekraanil. Selle kaamera suur kiirus on väga oluline punkt, mis mõjutab otseselt teravustamise ja asukoha otsimise kiirust.
