Mis vahe on fluorestsentsmikroskoobil ja pöördmikroskoobil
Rakukultuuris ja sellega seotud tuletiskatsetes on mikroskoop väga oluline instrument. Praegu on turul erinevat tüüpi mikroskoope. Vajadustele vastava ja rakendatava mikroskoobi valimine on väljakutse. Järgnevalt tutvustame pöördmikroskoopide ja fluorestsentsmikroskoopide põhimõtteid, et saaksite hõlpsalt valida.
Pöördmikroskoobi koostis on sama, mis tavalisel mikroskoobil, koosneb peamiselt kolmest osast: mehaaniline osa, valgustusosa ja optiline osa.
Pöördmikroskoobi koostis on sama, mis tavalisel püstisel mikroskoobil, välja arvatud see, et objektiiv ja valgustussüsteem on vastupidised, esimene asub lava all ja teine lava kohal.
Selline struktuur võib oluliselt laiendada efektiivset kaugust valgustuse kontsentreerimissüsteemi ja lava vahel, mis on mugav paigutada paksemaid vaadeldavaid objekte, nagu kultiveerimisnõud ja rakukultuuri pudelid (saadaval on loomulikult ka klaasklaasid jms) , ja samal ajal objektiivi ja materjali vaheline kaugus Nendevaheline töökaugus ei pea olema väga suur.
Pöördmikroskoope kasutatakse mikroorganismide, rakkude, bakterite, koekultuuride, suspensioonide, setete jms vaatlemiseks meditsiini- ja tervishoiuüksustes, kõrgkoolides ja uurimisinstituutides. See suudab pidevalt jälgida rakkude, bakterite jne paljunemis- ja jagunemisprotsessi kultiveerimissöötmes ning pildistada protsessi mis tahes kujul.
Seda kasutatakse laialdaselt tsütoloogias, parasitoloogias, onkoloogias, immunoloogias, geenitehnoloogias, tööstuslikus mikrobioloogias, botaanikas ja muudes valdkondades.
Fluorestsentsmikroskoopia abil uuritakse ainete imendumist ja transporti rakkudes, keemiliste ainete levikut ja lokaliseerumist jne.
Kontrollitava objekti puhul on fluorestsentsi tekitamiseks kaks võimalust: autofluorestsents, mis kiirgab fluorestsentsi vahetult pärast ultraviolettvalgusega kiiritamist;
Mõned rakkudes olevad ained, näiteks klorofüll, tekitavad pärast ultraviolettkiirtega kiiritamist autofluorestsentsi; kuigi mõned ained ise ei saa fluorestseeruda, võivad nad pärast ultraviolettkiirgusega kiiritamist fluorestseeruvate värvide või fluorestseeruvate antikehadega värvimise järel kiirata ka sekundaarset fluorestsentsi.
Fluorestsentsmikroskoobis kasutatakse kõrge valgustõhususega punktvalgusallikat, mis kiirgab ergastusvalgusena läbi filtrisüsteemi teatud lainepikkusega valgust (ultraviolettvalgus 365 nm või lilla sinine valgus 420 nm) ning pärast proovis olevate fluorestseeruvate ainete ergastamist eri fluorestsentsi kiirgamiseks. värve, siis Vaatlemine toimub objektiiviläätse ja okulaari suurenduse kaudu.
Sel viisil on tugeva kontrastsusega tausta all, isegi kui fluorestsents on väga nõrk, lihtne tuvastada ja see on kõrge tundlikkusega. Seda kasutatakse peamiselt raku struktuuri ja funktsioonide ning keemilise koostise uurimiseks.
