Püstise biofluorestsentsmikroskoop
Fluorestsentsmikroskoopia põhimõte on kasutada ülitõhusat punktvalgustiallikat (näiteks ülikõrge rõhu elavhõbedalampi), et eraldada teatud valguse lainepikkust (näiteks ultraviolettvalgus 3650 λ või lilla sinine tuli 4200 λ) värvifiltri süsteemi kaudu, mis ergutab fluorestseeruvaid aineid erinevatest fluorency-värvidest. Seejärel filtreeritakse see objektiivi taga oleva blokeerimise (või mahasurumise) filtriga ja täheldatakse okulaari suurendava toime kaudu.
Blokeerimisfiltril on kaks funktsiooni: esiteks neelab ja blokeerib erutusvalgust okulaari sisenemisest, et vältida fluorestsentsi segamist ja silmade kahjustamist; Teine eesmärk on valida ja võimaldada spetsiifilisel fluorestsentsil läbida, näidates konkreetset fluorestsentsvärvi.
Fluorestsentsmikroskoobid võib jaguneda kahte tüüpi valguse tee põhimõttel:
1. ülekandefluorestsentsmikroskoop
Vanemad fluorestsentsmikroskoobid kasutavad fluorestsentsi ergutamiseks tähelepanu keskpunkti, edastades ergutusvalgusallika läbi näidise materjali. Selle eeliseks on tugev fluorestsents väikese suurendusega, kuid selle puuduseks on see, et selle fluorestsents väheneb suurenemise suurenemisega. Seega sobib see ainult suuremate proovimaterjalide jälgimiseks.
2. langev kerge fluorestsentsmikroskoop
Ergastusvalgus langeb objektiivist proovi pinnale, kasutades samu objektiivi kui valgustuskondensaatori ja objektiivi fluorestsentsi kogumiseks.
Optilisele teele tuleb lisada kahevärvilise tala splitter (dikroiline peegel), mis moodustab optilise teljega 45 -kraadise nurga. Ergastusvalgus peegeldub objektiivis ja keskendub proovile. Proovi genereeritud fluorestsents, samuti objektiivi ja katteklaasi pinnalt peegelduv ergastusvalgus sisestage objektiivi korraga ja pöörduge tagasi kahevärvilise tala lõhestaja juurde, et eraldada ergutusvalgus ja fluorestsents. Seejärel blokeeritakse filtri neeldumine. Kui kasutatakse erinevaid ergastusfiltrite, kahevärviliste kiirte eraldajaid ja blokeerimisfiltreid, võivad need vastata erinevate fluorestsentsreaktsiooniproduktide vajadustele.
Selle fluorestsentsmikroskoobi eelised on ühtlane väljavalgus, selge pildistamine ja tugevam suurendusega fluorestsents.
