Seoses optilise teekonnaga on kahte tüüpi fluorestsentsmikroskoope:
1. Läbilaskev fluorestsentsmikroskoop: ergastusvalgusallikas on läbi kondensaatori peegli läbi proovimaterjali, et stimuleerida fluorestsentsi. Tavaliselt kasutatav tumevälja kollektor, võib kasutada ka tavalist kollektorit, reguleerida reflektorit nii, et ergutusvalgus edastaks ja prooviks mööda. See on vanemat tüüpi fluorestsentsmikroskoop. Eeliseks on see, et fluorestsents on väikese suurenduse korral tugev ja puuduseks on see, et fluorestsents nõrgeneb suurenduse suurenemisega. Seega on parem jälgida suuremat proovimaterjali.
2. Langevat tüüpi fluorestsentsmikroskoop see on uut tüüpi fluorestsentsmikroskoop, mis on välja töötatud viimasel ajal ja mille erinevus seisneb selles, et valguse ergastamine objektiiviläätsest alla proovikeha pinnale, see tähendab sama objektiivi kontsentraatori valgustus ja fluorestsentsobjektiivi kogumine. Optiline tee tuleb lisada kahevärvilisele valguskiire eraldajale, mis on valguse uraani suhtes 45° nurga all, ergastusvalgus peegeldub objektiivi ja kogutakse proovi, proovi tekitatud fluorestsentsi ja objektiivi. läätse pind, katteklaasi pind ergastava valguse peegeldumine objektiivi samaaegselt ja tagasi kahevärvilise valguskiire eraldajasse, nii et ergastusvalgus ja fluorestsents eraldatakse jääkergutusvalgusest ja neelduvad seejärel blokeerivad filtrid. Kui muudate erinevat ergastusfiltrit / kahevärvilist kiirte eraldajat / blokeeriva filtri kombinatsiooniplokki, võib see vastata erinevate fluorestsentsreaktsiooniproduktide vajadustele. Selle fluorestsentsmikroskoobi eelised on ühtlase valgustuse vaateväli, selge kujutis, mida suurem on fluorestsentsi suurendus, seda tugevam.
(B) fluorestsentsmikroskoobi meetod.
1. Avage valgusallikas, ülikõrgsurve elavhõbedalamp, et eelsoojendada mõni minut, et jõuda kõige heledama punktini.
2. Läbilaskev fluorestsentsmikroskoop tuleb paigaldada valgusallika ja filtri stimuleerimiseks vajaliku kontsentraatori vahele, objektiivi tagaküljele koos vastava blokeeriva filtriga. Langev fluorestsentsmikroskoop tuleb sisestada vajaliku ergastusfiltri / kahevärvilise valguskiire eraldaja / blokeeriva filtri sisestuste optilise tee pessa.
3. Vaatlege väikese suurendusega objektiiviga ja reguleerige valgusallika keskosa nii, et see asuks kogu valgustuspunkti keskel vastavalt erinevate fluorestsentsmikroskoopide mudelite reguleerimisseadmele.
4. Asetage proovitükk, et jälgida teravustamist. Kasutamisel tuleks tähelepanu pöörata: filtrite paigaldamise lõpus ärge kasutage silma otse jälgimiseks, et mitte tekitada silmakahjustusi; proovi vaatlemiseks õlipeegliga peate kasutama spetsiaalset mittefluorestseeruvat õlipeeglit; Kõrgsurve elavhõbedalampi ei saa kohe pärast lambi sulgemist uuesti avada, peate olema 5 minutit, enne kui saate uuesti käivitada, vastasel juhul on see ebastabiilne, mõjutades elavhõbelambi eluiga.
(C) Vaatlus Fluorestsentsmikroskoobi all õpetamisjärgus sinise-violetse valguse filtriga on näha 0,01% amidiinoranži fluorestsentsvärviga värvitud rakud ning rakkude tuum ja tsütoplasma ergastatakse, et tekiks kaks erinevat fluorestsentsi värvid (tumeroheline ja oranžikaspunane).
