Valgusteede põhjal on kahte tüüpi fluorestsentsmikroskoope.
1. Läbilaskev fluorestsentsmikroskoop: ergastav valgusallikas läbib proovi materjali läbi kondensaatori, et ergutada fluorestsentsi. Tavaliselt kasutatakse tumeda välja kollektorit või tavalist kollektorit ning reflektor on reguleeritud nii, et ergastav valgus proovile suunaks ja külgkiirguseks. See on vanem fluorestsentsmikroskoop. Eeliseks on see, et fluorestsents on madalal suurendusel tugev, miinuseks aga see, et suurenduse suurenedes fluorestsents nõrgeneb. Seetõttu on parem vaadelda suuremaid proovimaterjale.
2. Epi-fluorestsentsmikroskoop on uut tüüpi fluorestsentsmikroskoop, mis on välja töötatud kaasajal. Erinevus ülaltoodust seisneb selles, et ergastav valgus langeb objektiivilt allapoole proovi pinnale, st sama objektiivi kasutatakse nii valgustuskondensaatorina kui ka fluorestsentsi kogumise objektiivina. Optilisele teele tuleb lisada kahevärviline kiirjaotur, mis on optilise uraani puhul 45%. Nurk, ergastusvalgus peegeldub objektiivi ja kontsentreeritakse proovile. Proovi tekitatud fluorestsents ning objektiiviläätse pinnalt ja katteklaasi pinnalt peegelduv ergastusvalgus sisenevad üheaegselt objektiivi ja naasevad dikromaatilise kiire jaoturisse, nii et ergastusvalgus Fluorestsentsist eraldatud jääkergutus. seejärel neelab valgust blokeeriv filter. Kui kasutate erinevaid ergastusfiltri/kahevärvilise kiirjaoturi/blokeeriva filtri kombinatsiooni, saate rahuldada erinevate fluorestsentsreaktsiooniproduktide vajadused. Seda tüüpi fluorestsentsmikroskoobi eeliseks on see, et vaateväli on ühtlaselt valgustatud, pilt on selge ja mida suurem on suurendus, seda tugevam on fluorestsents.
(2) Kuidas kasutada fluorestsentsmikroskoopi.
1. Lülitage valgusallikas sisse ja ülikõrgsurve elavhõbedalamp peab oma eredaima punkti saavutamiseks mitu minutit soojenema.
2. Läbilaskevõimelised fluorestsentsmikroskoobid nõuavad valgusallika ja kondensaatori vahele vajaliku ergastusfiltri paigaldamist ning vastava blokeerimisfiltri paigaldamist objektiivi taha. Epi-fluorestsentsmikroskoobid peavad sisestama vajaliku ergastusfiltri / kahevärvilise kiire jaoturi / blokeeriva filtri sisendi valguse tee pessa.
3. Kasutage väikese suurendusega mikroskoopi, et jälgida ja reguleerida valgusallika keskpunkti vastavalt erinevate mudelite fluorestsentsmikroskoobide reguleerimisseadmetele nii, et see asuks kogu valgustuspunkti keskel.
4. Asetage proovitükk ja reguleerige jälgimiseks fookust. Palun pöörake kasutamisel tähelepanu: Ärge jälgige filtrit otse silmadega, et vältida silmade kahjustamist; proovi õliläätsega vaatlemisel tuleb kasutada spetsiaalset mittefluorestseeruvat õliläätse; kõrgsurve elavhõbedalampi ei saa kohe pärast selle väljalülitamist uuesti avada. Selle saab uuesti käivitada 5 minuti pärast, vastasel juhul on see ebastabiilne ja mõjutab elavhõbedalambi eluiga.
(3) Vaadelge fluorestsentsmikroskoobi all õppeplatvormil, kasutades sinakasvioletset valgusfiltrit. On näha, et käik on o. Rakkudes, mis on värvitud 01% akridiinoranži fluorestsentsvärviga, ergastatakse tuum ja tsütoplasma kahe erineva fluorestsentsivärvi (tumeroheline ja oranžikaspunane) tekitamiseks.
