Fluorestsentsmikroskoope on nende optilise teekonna põhjal kahte tüüpi:
1. Transmissiooni fluorestsentsmikroskoop: ergastusvalgusallikas edastatakse fluorestsentsi ergutamiseks läbi proovimaterjali läbi kondensaatori. Tavaliselt kasutatavaid tumevälja valguskollektoreid või tavalisi valguskollektoreid saab kasutada reflektori reguleerimiseks, et muuta ergutusvalgus ja külgvalgus proovile. See on suhteliselt vanamoodne fluorestsentsmikroskoop. Selle eeliseks on see, et fluorestsents on madalal suurendusel tugev, miinuseks aga see, et suurenduse suurenedes fluorestsents nõrgeneb. Seetõttu on see parem suuremate proovimaterjalide vaatlemiseks.
2. Langevate kiirtega fluorestsentsmikroskoop See on uut tüüpi fluorestsentsmikroskoop, mis on välja töötatud tänapäeval. Erinevalt eelmisest langeb ergastusvalgus objektiivilt alla katsekeha pinnale, kasutades fluorestsentsi kogumiseks sama objektiivi kui valgustuskondensaatorit ja objektiivi. Optilisele teele, mis on heleda uraani suhtes 45 kraadise nurga all, tuleb lisada kahevärviline valguskiire eraldaja. Ergastusvalgus peegeldub objektiivil ja kontsentreeritakse proovile. Proovi tekitatud fluorestsents, samuti objektiiviläätse ja katteklaasi pinnalt peegelduv ergastusvalgus sisenevad üheaegselt objektiiviläätsesse ja naasevad ergastuse ja fluorestsentsi eraldavasse dikrooskiire eraldajasse. Seejärel neelab jääkergutus blokeerivasse filtrisse. Kui kasutatakse erinevaid ergastusfiltreid/kahevärvikiire eraldajaid/blokeerivaid filtrite kombinatsioone, vastavad need erinevate fluorestseeruvate reaktsiooniproduktide vajadustele. Selle fluorestsentsmikroskoobi eeliseks on see, et vaatevälja valgustus on ühtlane, kujutis on selge ja mida suurem on suurendus, seda tugevam on fluorestsents.
(2) Fluorestsentsmikroskoobi kasutamine
1. Lülitage valgusallikas sisse ja ülikõrgsurve elavhõbedalampi tuleb haripunkti saavutamiseks paar minutit eelsoojendada.
2. Läbilaskva fluorestsentsmikroskoobi jaoks on vaja lambiallika ja kondensaatori vahele paigaldada vajalik ergastusfilter ning objektiivi taha vastav blokeeriv filter. Langevate kiirtega fluorestsentsmikroskoop peab sisestama vajaliku ergastusfiltri / kahevärvilise kiire eraldaja / blokeeriva filtriploki optilise tee pessa.
3. Jälgige väikese võimsusega mikroskoobiga ja reguleerige valgusallika keskosa vastavalt erinevate mudelite fluorestsentsmikroskoobide reguleerimisseadmetele nii, et see asuks kogu valgustuspunkti keskel.
4. Asetage proovilõigud ja teravustage need jälgimiseks. Kasutamise ajal tuleb silmas pidada, et lõplikku filtrit ei tohiks silmadega otse jälgida, et vältida silmakahjustusi; Proovide vaatlemisel õlimikroskoobiga tuleb kasutada spetsiaalset mittefluorestseeruvat õlimikroskoopi; Pärast kõrgsurve elavhõbedalambi väljalülitamist ei saa seda kohe uuesti sisse lülitada. Uuesti käivitamiseks peab kuluma 5 minutit, vastasel juhul on see ebastabiilne ja mõjutab elavhõbedalambi eluiga.
(3) Vaadeldes õppeplatvormil fluorestsentsmikroskoobi all, kasutades sinililla valgusfiltrit, on näha, et 0,01 protsendi akridiinoranži fluorestsentsvärviga värvitud rakud, tuum ja tsütoplasma stimuleeritakse tootma kahte erinevat fluorestsentsi värvid (tumeroheline ja oranž punane).
