Fluorestsentsmikroskoobi struktuur ja põhikomponendid
(1) Valgusallikas
Tänapäeval kasutatakse valgusallikana tavaliselt 200 W ülikõrgsurve elavhõbedalampi. See on valmistatud kvartsklaasist, keskel on sfääriline kuju ja sees on täidetud teatud kogus elavhõbedat. Töötamise ajal põhjustab kahe elektroodi vaheline tühjenemine elavhõbeda aurustumist ja kera sees olev rõhk tõuseb kiiresti. Kui elavhõbe täielikult aurustub, võib see jõuda standardse atmosfäärirõhuni 50-70, mis võtab tavaliselt aega umbes 5-15 minutit. Ülikõrgsurve elavhõbedalampide luminestsents tuleneb elektroodide vahelisest tühjenemisest, mis pidevalt dissotsieerub ja vähendab elavhõbeda molekule ning kiirgab footoneid. See kiirgab tugevat ultraviolett- ja sinivioletset valgust, millest piisab erinevate fluorestseeruvate ainete ergutamiseks, seetõttu kasutatakse seda laialdaselt fluorestsentsmikroskoopides.
Ülikõrgsurve elavhõbedalambid eraldavad ka suurel hulgal soojusenergiat. Seetõttu peavad lambiruumis olema head soojuse hajumise tingimused ja töökeskkonna temperatuur ei tohiks olla liiga kõrge.
Uus ülikõrgsurve elavhõbedalamp ei vaja kasutamise varases staadiumis süttimiseks kõrget pinget. Pärast mõnda aega kasutamist tuleb see kõrgepingega (umbes 15000 V) käivitada. Pärast käivitamist hoitakse tööpinget üldiselt 50-60V ja töövool on umbes 4A. 200 W ülikõrgsurve elavhõbedalambi keskmine eluiga on umbes 200 tundi, kui seda kasutatakse iga kord 2 tundi. Mida lühem on tööaeg, seda lühem on eluiga. Kui seda kasutatakse ainult 20 minutit üks kord, väheneb eluiga 50%. Seetõttu proovige kasutamisel käivitamiste arvu minimeerida. Lambipirni valgusefektiivsus väheneb kasutamise käigus järk-järgult. Kui tuli kustub, peab see enne taaskäivitamist ootama jahtumist. Pärast lambipirni süütamist ei tohiks seda kohe välja lülitada, et vältida elavhõbeda mittetäielikku aurustumist ja elektroodi kahjustamist. Üldiselt peab see ootama 15 minutit. Ülikõrgsurve elavhõbelambi kõrge rõhu ja tugeva ultraviolettkiirguse tõttu tuleb lambipirn enne süütamist asetada lambikambrisse, et vältida silmade vigastusi ja plahvatust töö ajal.
Ülikõrgsurve elavhõbedalambi (100 W või 200 W) valgusallika vooluahel ja selle komponendid, sealhulgas pinge muundamine, voolu summutamine ja käivitamine. Lambiruumis on pirni valguskeskme reguleerimise süsteem, mille lambipirni taha on paigaldatud alumiiniumkattega nõgus reflektor ja ette valgust koguv lääts.
Kodumaal toodetud ülikõrgsurve elavhõbedalambil GCQ-200 on hea jõudlus ja see võib asendada imporditud pirne, nagu HBO-200, mille keskmine eluiga on üle 200 tunni ja hind on suhteliselt madal.
Hiinas välja töötatud lihtne ja kaasaskantav kõrge värvitemperatuuriga broomi volframist fluorestseeruv valgusallika seade, väikese mahu, kerge, väikese võimsusega, vahelduv- ja alalisvoolu kahekordse kasutusega (sisseehitatud alalisvoolu toiteallikaga), lihtne kaasas kanda, mugav kasutada , on reklaamitud ja rakendatud.
(2) Värvifiltrisüsteem
Värvifiltrisüsteem on fluorestsentsmikroskoobi oluline osa, mis koosneb ergastusfiltriplaadist ja survefiltriplaadist. Filtriplaadi mudel on tootjate vahel sageli ebaühtlane. Filterplaadid on üldiselt oma nime saanud põhivärvitooni järgi, kusjuures esimene täht tähistab värvitooni, teine täht klaasi ja number mudeli omadusi. Olympuse mikroskoop
(3) Objektiiv
Kasutada saab erinevaid objektiiviläätsesid, kuid akromaatiliste objektiivide kasutamine sobib fluorestsentsi jaoks nende ülimadala isefluorestsentsi ja läbilaskvuse (lainepikkuse vahemiku) tõttu. Kuna kujutise fluorestsentsi heledus mikroskoobi vaateväljas on otseselt võrdeline objektiiviläätse ava suhte ruuduga ja pöördvõrdeline selle suurendusega, on fluorestsentskujutise heleduse parandamiseks vaja objektiivi objektiivi. tuleks kasutada suurema avaarvuga. Eriti suure suurenduse korral on selle mõju väga märkimisväärne. Seetõttu tuleks ebapiisava fluorestsentsiga proovide puhul kasutada suure avaga objektiivi, mis on kombineeritud võimalikult madala okulaariga (4 x, 5 x, 6,3 x jne).
(4) Peegeldav peegel
Reflektori peegeldav kiht on üldiselt kaetud alumiiniumiga, kuna alumiinium neelab vähem ultraviolett- ja nähtavat valgust sinises lillas piirkonnas, peegeldus on üle 90%, samas kui hõbe peegeldab ainult 70%; Üldjuhul kasutatakse lamedaid helkureid.
(5) Kohtvalgusti peegel
Spetsiaalselt fluorestsentsmikroskoopia jaoks loodud ja valmistatud kontsentraator on valmistatud kvartsklaasist või muust ultraviolettvalgust läbivast klaasist. Eraldi vaateväljaga tumevälja spottereid on kahte tüüpi. Samuti on diferentsiaalfluorestsentsi kontsentraator.
(6) Langeva valguse seade
Uut tüüpi langeva valguse seade peegeldab lühema lainepikkusega osad (ultraviolett ja lilla sinine) valgusallikast interferentsispektrofotomeetri filtrisse tänu filtril oleva katte omadustele. Kui filter on suunatud valgusallika poole 45 kraadise nurga all. Kallutamisel on see suunatud vertikaalselt objektiiviläätse poole ja läbi objektiivi näidise poole, põhjustades proovi ergutamist. Sel hetkel toimib objektiiv otse kondensaatorina. Samas on filtri pikad osad (roheline, kollane, punane jne) filtrile läbipaistvad, seega ei peegeldu need objektiivi suunas. Filter toimib ergastusfiltriplaadina ja kuna proovi fluorestsents on nähtava valguse pika lainepikkuse piirkonnas, saab seda läbi filtri jälgida ja objektiivini jõuda. Fluorestsentskujutise heledus suureneb suurendusega ja on tugevam kui suure suurendusega läbiva valguse allikas. Lisaks läbilaskva valgusallika funktsioonile sobib see paremini läbipaistmatute ja poolläbipaistvate proovide, nagu paksud plaadid, filtermembraanid, kolooniad, koekultuuri proovid jne, otseseks vaatlemiseks. Viimastel aastatel on fluorestsentsmikroskoobid sageli välja töötatud. kasutage langeva valguse seadmeid, mida nimetatakse langeva valguse fluorestsentsmikroskoopideks.
