Fluorestsentsmikroskoobi spetsiaalne struktuur sisaldab:
(I) Värvifiltrisüsteem
Värvifilter on fluorestsentsmikroskoobi oluline osa, selle põhikomponendid on ergastusvalgusfilter (esimene tõkkefilter), emissioonivalgusfilter (teine barjäärifilter) ning poolläbipaistev ja pooleldi filtrivastane (kiirt jagav peegel) koostis. . Erinevad värvifiltrite mudelite tootjad, nimi pole sageli ühtlane.
1. Ergastusvalguse filter ja emissioonivalguse filter: vastavalt valgusallikale ja fluorokroomi omadustele vali tavaliselt järgmised kolm sobitustüüpi, et tagada ergastava valguse teatud lainepikkuse vahemik ja teha proovi ergastus fluorestsentsi kaudu. okulaar pildistamisele.
UV-ergastus: Ergastusvalguse filter võimaldab UV-valgust edastada ja blokeerib nähtava valguse läbipääsu lainepikkusel üle 400 nm. Vastav emissioonifilter võimaldab läbida sinist valgust, mis paistab vaateväljas sinisena, nt DAPI värvimisel.
Sinise valguse ergastus: Ergastusvalguse filter laseb läbi sinise valguse, blokeerides teised valguse lainepikkused. Vastav emissioonifilter võimaldab rohelise valguse läbimist, nt GFP värvimismarkerite jaoks.
Roheline ergutus: Ergastusfilter laseb läbi rohelise valguse, blokeerides teised lainepikkused. Vastav emissioonifilter laseb tavaliselt läbi punase valguse, nt rodamiini värvimine.
2. Poolläbipaistev ja poolpeegeldav filter: selle roll on täielikult blokeerida valguse ergastus läbi peegelduse; ja läbi kiiratava valguse vastava lainepikkuse vahemiku. Selle mudel ja valgusfiltrite ergastus ja valgusfiltrite emissioon vastavad.
(B) objektiiv ja okulaar
Kasutada saab mitmesuguseid objektiiviläätsesid, kuid * hea valik sümmeetrilisi akromaatseid objektiive, kuna selle autofluorestsents on väga väike ja valguse läbilaskeomadused (lainepikkuse vahemik) sobivad fluorestsentsi jaoks. Kuna kujutise fluorestsentsi heledus mikroskoobi vaateväljas on võrdeline objektiivi koonu sageduse ruuduga ja pöördvõrdeline selle suurendusega, siis fluorestsentskujutise heleduse parandamiseks peaks suure koonusagedusega objektiiv kasutada. Eriti fluorestsents ei ole piisavalt tugev proovid, tuleks kasutada suurt suu kiirust, kõrge valguse läbilaskevõime objektiiv, võimalikult madala okulaariga.
C) muud optilised seadmed
Reflektor, selle peegeldav kiht on üldiselt alumiiniumiga kaetud, kuna alumiinium neeldub ultraviolettkiirgust ja nähtavat valgust sinililla piirkonnas vähem, peegeldades kuni 90% või rohkem (samas kui hõbeda peegeldusvõime on ainult 70%). Üldiselt kasutatakse lamedaid helkureid. Kvartsklaasist või muust UV-kiirgust läbipaistvast klaasist prožektoripeegel, mis on loodud ja toodetud spetsiaalselt fluorestsentsmikroskoopia jaoks. Langeva valguse seade, mis lisaks läbiva valgusallika funktsioonile sobib paremini läbipaistmatute ja poolläbipaistvate proovide jaoks, nagu paks kile, filtermembraan, koloonia, koekultuur ja muud proovid otseseks vaatluseks. Viimastel aastatel on välja töötatud uut tüüpi fluorestsentsmikroskoop, mis kasutab langeva valguse seadet, mida nimetatakse langevaks fluorestsentsmikroskoobiks.
(D) valgusallikas
Tänapäeval kasutatakse valgusallikana 50 või 100 W kõrgsurve elavhõbelampi. Kahe elektroodi tühjenemine, mis on põhjustatud elavhõbeda aurustumisest, õhurõhu pall tõuseb kiiresti (see protsess kestab tavaliselt umbes 5–15 minutit) ja valguskvantide emissiooni protsessis on eralduva valguse lainepikkus piisav ergastamiseks. igat tüüpi fluorestseeruvaid aineid, seetõttu kasutatakse fluorestsentsmikroskoopiat tavaliselt.
Elavhõbedalampide kasutusiga on suhteliselt lühike, tavaliselt 200 tundi, ning vastusena sellele kasutusea piirangule on viimastel aastatel laialdaselt kasutatud uut luminofoorvalgusallikat X-Cite, kuna lambi kasutusiga on pikk (2000 tundi) ja paindlik kasutus. - eelsoojendus pole vajalik ja see on kohe karbist võttes kasutamiseks valmis.
