Erinevus kahefotoni mikroskoopia ja laserkonfokaalse mikroskoopia vahel
Laserkonfokaalne mikroskoop on vaatlus-, analüüsi- ja väljundsüsteemide komplekt, mis kasutab valgusallikana laserit, konjugaatfookusprintsiipi ja -seadet traditsioonilise optilise mikroskoobi alusel ning vaadeldava objekti digitaalset pilditöötlust arvuti abil. Peamiste süsteemide hulka kuuluvad laservalgusallikad, automaatsed mikroskoobid, skaneerimismoodulid (sh konfokaalsed optilise tee kanalid ja nööpaugud, skaneerimispeeglid, detektorid), digitaalsed signaaliprotsessorid, arvutid ja pildiväljundseadmed (kuvarid, värviprinterid). Laserskaneeriva konfokaalse mikroskoobi abil on võimalik teostada vaadeldavast proovist tomograafiat ja pildistamist. Seetõttu on võimalik rakkude kolmemõõtmelist ruumilist struktuuri kahjustusteta jälgida ja analüüsida.
Samal ajal on laserskaneeriv konfokaalne mikroskoopia ka võimas tööriist elusrakkude dünaamiliseks jälgimiseks, mitmekordseks immunofluorestsentsmärgistamiseks ja ioonfluorestsentsmärgistamiseks. See analüüsib täpselt spektri olemust ja eristab signaale erinevatelt märgistelt, mille emissioonispektrid on väga kattuvad.
Kõige olulisem on see, et mitmevärvilise fluorestsentsvärvimise korral võib see täielikult kõrvaldada fluorestsentsi läbirääkimise mõju, minimeerides samal ajal proovi fluorestsentssignaali kadu. Need on kõik asjad, mida tavalised peeglid ei saavuta.
Fookuskauguse suhe mikroskoobi objektiivi ja okulaari vahel
Erinevad põhimõtted
1. Fluorestsentsmikroskoop: see kasutab ultraviolettvalgust valgusallikana, et valgustada katsetatavat objekti, tekitades selle fluorestsentsi, ning seejärel jälgida objekti kuju ja asendit mikroskoobi all.
2. Laser-konfokaalne mikroskoop: fluorestsentsmikroskoopilise kujutise põhjal paigaldatakse laserskaneerimisseade fluorestsentssondide ergutamiseks ultraviolett- või nähtava valguse abil.
Erinevad omadused
1. Fluorestsentsmikroskoop: kasutatakse ainete imendumise, transpordi, jaotumise ja lokaliseerimise uurimiseks rakkudes. Mõned rakkudes olevad ained, näiteks klorofüll, võivad pärast ultraviolettkiirgusega kokkupuudet kiirata fluorestsentsi; Mõned ained ise ei pruugi fluorestsentsi kiirata, kuid fluorestseeruvate värvainete või fluorestseeruvate antikehadega värvituna võivad nad kiirata ka ultraviolettkiirguse mõjul fluorestsentsi.
2. Laserkonfokaalne mikroskoop: arvuti kasutamine pilditöötluseks, et saada fluorestseeruvaid kujutisi rakkude või kudede sisemisest mikrostruktuurist ja jälgida füsioloogilisi signaale, nagu Ca2+, pH väärtus, membraanipotentsiaal ja muutused raku morfoloogias. subtsellulaarsel tasemel.
