Erinevus MINI skaneeriva elektronmikroskoobi SEM ja optilise mikroskoobi vahel
Elektronmikroskoop on suur instrument, mis kasutab valgusallikana elektronkiirt ja pildistab proovi fluorestsentsekraanil läbi elektronide voolu ülekande või peegelduse ja elektromagnetläätse mitmetasandilise võimenduse. Elektronmikroskoop asendab nähtava valguse elektronide vooluga ja lääts magnetväljaga, võimaldades asendada elektronide liikumist. See kasutab röntgenpildistamist palju lühema lainepikkusega kui tavaline nähtav valgus ja sellel on kõrge eraldusvõime. Optiline mikroskoop on seevastu optiline instrument, mis kasutab nähtava valguse valgustust väikeste objektide suurendatud kujutiste moodustamiseks. Kokkuvõttes on elektronmikroskoopide ja optiliste mikroskoopide vahel mitu peamist erinevust:
1. Erinevad valgusallikad. Elektronmikroskoopias kasutatav valgusallikas on elektronkahuri kiirgav elektronvoog, valguspeegli valgusallikaks on aga nähtav valgus (päikesevalgus või valgus). Kuna elektronide voolu lainepikkus on palju lühem kui valguslaine lainepikkus, on elektronmikroskoopia võimendus ja eraldusvõime oluliselt kõrgem kui valguspeeglil.
2. Erinevad läätsed. Elektronmikroskoopias suurendavat rolli mängivaks objektiiviks on elektromagnetlääts (ringikujuline elektromagnetmähis, mis võib tekitada magnetvälja * piirkonnas), valgusläätse objektiiviks on aga lihvklaasist valmistatud optiline lääts. Elektronmikroskoopias on kolm elektromagnetläätsede komplekti, mis on funktsioonilt samaväärsed optiliste läätsede kondensaatori, objektiivi ja okulaariga.
3. Erinevad pildistamise põhimõtted. Elektripeeglis võimendatakse testitavale proovile mõjuvat elektronkiirt elektromagnetläätse abil ja projitseeritakse pildistamiseks fluorestsentsekraanile või kantakse pildistamiseks valgustundlikule kilele. Elektronide intensiivsuse erinevuse mehhanism seisneb selles, et kui elektronkiir mõjutab testitavat proovi, põrkuvad langevad elektronid materjali aatomitega, mille tulemuseks on hajumine. Elektronide erineva hajumise astme tõttu proovi erinevates osades esitatakse proovi elektronkujutis intensiivsusega. Näidise objektikujutis optilises peeglis esitatakse heleduse erinevusena, mis on tingitud erinevusest selles, kui palju valgust neelavad testitava proovi erinevad struktuurid.
4. Kasutatavate proovide valmistamise meetodid on erinevad. Elektronmikroskoopias vaatlemiseks kasutatavate koe- ja rakuproovide ettevalmistamise protsess on keeruline, tehniliste raskuste ja kuludega. Proovide võtmise, fikseerimise, dehüdratsiooni ja sisestamise etapis on vaja spetsiaalseid reaktiive ja toiminguid. Pärast kinnistamist tuleb manustatud koeplokid lõigata üliõhukese viilutaja abil üliõhukesteks proovilõikudeks paksusega 50-100 nm. Mikroskoobi all vaadeldavad proovid asetatakse tavaliselt klaasklaasile, näiteks tavalised koelõigete proovid, rakumäärimise proovid, koe kokkupressimise proovid ja rakutilkade proovid.
Optilise mikroskoobi eraldusvõime on seotud valguslainete lainepikkusega. Objektide puhul, mis on valguslainete lainepikkusele lähedased või sellest väiksemad, on optilised mikroskoobid jõuetud. Elektronide liikumise lainepikkus on palju pikem kui valguslainetel ja näha on väiksemaid objekte. Optiline mikroskoop on suurendav pildisüsteem, mis koosneb optiliste läätsede komplektist, samal ajal kui elektronmikroskoop kasutab nähtava valguse asemel elektronide voogu, läätse asemel magnetvälja, võimaldades elektronide liikumisel footoneid asendada, võimaldades vaadelda väiksemad objektid kui need, mida optiline süsteem näeb.
