Erinevus elektronmikroskoobi ja digitaalmikroskoobi vahel
Mõiste "digitaalne mikroskoop" viitab tegelikult digitaalsele pilditöötlusseadmele, mis on kinnitatud optilise mikroskoobi külge ja võib kuvada mikroskoobiga loodud kujutist otse arvutiekraanil. See on üles ehitatud optilisele mikroskoobile ja kasutatakse elektronmikroskoobi kujutise kontseptsiooni põhilisi toiminguid. vahet. Sel juhul peame tegema vahet eraldusvõime ja suurenduse vahel. Sissesuumitud väikese elemendi pildi kõrge eraldusvõime sõltub peegeldunud valguslaine lainepikkusest. Eraldusvõime suureneb, kui lainepikkus lüheneb. Kui tavalistel "digitaalmikroskoobidel" võib olla väga suur suurendus, siis eraldusvõimet tõsta ei saa, siis elektronmikroskoobid kasutavad röntgenpildistamist, mille lainepikkus on loomulikult tunduvalt lühem kui tavaline nähtav valgus ja mille eraldusvõime on väga kõrge.
Valguslaine lainepikkus mõjutab optilise mikroskoobi eraldusvõimet. Optiline mikroskoop ei suuda tuvastada objekte, mis on valguse lainepikkusele lähedased või sellest väiksemad. Väiksemaid objekte saab näha, kuna elektronide liikumise lainepikkus on oluliselt väiksem kui valguslaine lainepikkus. Elektronmikroskoop kasutab nähtava valguse asemel elektronide voogu, läätsede asemel magnetvälja ja footonite asemel elektronide liikumist, et näha objekte, mis on väiksemad kui need, mida optiline süsteem näeb. Optiline mikroskoop on suurendatud pildisüsteem, mis koosneb optiliste läätsede komplektist.
Optiline mikroskoop kasutab väikeste objektide suurendatud kujutise loomiseks nähtava valguse valgustust, samas kui elektronmikroskoop on suuremahuline instrument, mis kasutab valgusallikana elektronkiire, et moodustada fluorestsentsekraanil elektronide voolu ülekande või peegelduse kaudu pilte. proovi kohta ja elektromagnetläätse mitmeastmeline suurendus. Kokkuvõttes eristavad elektronmikroskoobid optilistest mikroskoopidest järgmised omadused:
1. Mitmesugused valgustusallikad Elektronkahuri kiirgav elektronvoog on elektronmikroskoobi valgusallikaks, nähtav valgus aga valgusmikroskoobi valgusallikaks (päikesevalgus või valgus). Elektronmikroskoobi suurendus ja eraldusvõime on oluliselt suuremad kui valgusmikroskoobi omad, kuna elektronide voo lainepikkus on palju lühem kui valguslainel.
2. Erinevad läätsed Kui valgusmikroskoobi objektiiv on klaasist valmistatud optiline lääts, siis elektronmikroskoobi suurendusobjektiiviks on elektromagnetlääts (rõngakujuline elektromagnetmähis, mis võib tekitada magnetvälja keskosas). Valgusmikroskoobi kondensaatorläätse, objektiivi ja okulaari funktsioonid on elektronmikroskoobis analoogsed kolme elektromagnetläätsede rühmaga.
3. Kasutatakse teistsugust pildistamise põhimõtet. Elektronmikroskoobi elektromagnetlääts võimendab uuritavale proovile mõjuvat elektronkiirt, enne kui seda saab pildistada fluorestsentsekraanil või valgustundlikul filmil. Kui elektronkiir tabab testitavat proovi, põrkuvad langevad elektronid aine aatomitega, et tekitada hajumist, mis on elektrontiheduse muutumise mehhanism. Proovi elektronpilt on esitatud toonides, kuna proovi erinevad osad hajutavad elektrone erineva kiirusega. Proovi objektipilt kuvatakse valgusmikroskoobis heleduse erinevusena, mis tuleneb valguse hulga muutumisest. uuritava valimi erinevad struktuurid.
4. Proovide ettevalmistamiseks kasutatakse erinevaid tehnikaid. Nii tehnilised raskused kui ka kulud koerakkude proovide ettevalmistamisel elektronmikroskoobi all vaatamiseks on olulised. Materjali kogumine, fikseerimine, dehüdratsioon ja kinnistamine on etapid, mis nõuavad spetsiaalseid kemikaale ja protseduure. Järgmisena tuleb sisseehitatud koeplokid lõigata üliõhukesteks proovilõikudeks, kasutades ultra-mikrotoomi paksusega 50–100 nm. Valgusmikroskoopia proovid, nagu tavalised koelõikude proovid, rakumäärimise proovid, koe kokkupressimise proovid ja rakutilkade proovid, paigaldatakse tavaliselt slaididele.
