Inverteeritud fluorestsentsmikroskoopia õige kasutamine
Pööratud fluorestsentsmikroskoop on multifunktsionaalne mikroskoop, mida kasutatakse kõrgetasemelistes bioloogilistes teadusuuringutes. Selle struktuur on keeruline ja kallis. Seetõttu peavad õpetajad pöördfluorestsentsmikroskoobi töö- ja kasutusstandardite õigeks valdamiseks enne pöördfluorestsentsmikroskoobi tegeliku toimimise demonstreerimist õpetama esmalt pöördfluorestsentsmikroskoobi põhiteadmisi. Nad peaksid tutvustama pöördfluorestsentsmikroskoobi struktuuri, põhimõtet, funktsiooni ja põhilisi kasutusmeetodeid ning seejärel demonstreerima erinevate proovide erinevaid funktsioone konkreetsetes kasutustoimingutes, muutes järk-järgult pöördfluorestsentsmikroskoobi toimimise ja kasutamise meditsiiniõppuritele standardiks.
1. Visuaalse vaatluse õige kasutamine. Pööratud fluorestsentsmikroskoobi üks funktsioone on jälgida eredas vaateväljas. Selle põhiprintsiip on saavutada pildistamine eredal taustal, mis põhineb proovi iga osa erineval valguse neeldumisel pärast valgusega valgustamist. See sobib peamiselt määrdunud või värvitud rakkude, koelõikude ja muude proovide vaatlemiseks.
2. Diferentsiaalvaatluse õige kasutamine. Inverteeritud fluorestsentsmikroskoobi teine funktsioon on faasierinevuse jälgimine. Selle põhiprintsiip on teisendada proovi erinevate osade optilise tee erinevus amplituudide erinevuseks ja jälgida läbi faasierinevuse objektiivi faasiplaadi ja ümmarguse avaga prožektoriga. See sobib peamiselt elusrakkude või värvimata koelõikude vaatlemiseks. Eksperimentaalõppe käigus on lisaks arstiteaduskonna magistrantide õigele suunamisele järgima faasierinevuse vaatluse põhilisi töömeetodeid, kuid olulisem on suunata neid faasierinevusvaatluse abil proovide mõistmisele ja valdamisele. Nende jaoks on tulevastes teadusuuringutes kõige sagedamini kasutatav meetod kultiveeritud rakkude mikroskoopiline vaatlus. Esiteks on rakuvarustuse valikul üldiselt soovitatav kasutada klaas- ja plastikmaterjalist kultiveerimisnõusid, taldrikuid ja pudeleid. Need on enamasti värvitud ja läbipaistvad ning neid saab otse vaadelda pööratud fluorestsentsmikroskoobi all, ilma et oleks vaja rakuvedelikku välja valada või läbida muid töötlusi. Teiseks, ärge avage mikroskoopilise vaatluse ajal seadme kaant juhuslikult, et vältida rakkude saastumist. Lõpuks peaksid operaatorid kandma kindaid, maske ja valgeid kitleid, et mitte ainult kaitsta oma tervist, vaid ka vältida rakkude saastumist.
3. Fluorestsentsvaatluse õige kasutamine. Pööratud fluorestsentsmikroskoobi kolmas funktsioon on fluorestsentsi jälgimine. Selle põhiprintsiip on ergastusvalguse kasutamine proovi ergutamiseks fluorestsentsi tekitamiseks, saavutades seeläbi proovi kuju ja asukoha jälgimise. See sobib peamiselt fluorestsentsmärgisega proovide vaatlemiseks. Fluorestsentsvaatlus on pöördfluorestsentsmikroskoopia oluline funktsioon kallite tarvikute ja eriotstarbelise kasutusega. Selleks, et meditsiini kraadiõppurid saaksid õigesti omandada fluorestsentsvaatluse töönormid, ei õpeta õpetajad neile mitte ainult põhilisi töömeetodeid, vaid, mis veelgi olulisem, õpetavad neile selle ainulaadsust. Esiteks peab proovi ettevalmistamisel objektiklaasi ja katteklaasi pind olema sile ja sobiv paksus (slaid peaks olema vahemikus 0,8–1,2 mm ja katteklaas peaks olema umbes {{5). }},17 mm); Proov peab olema sobiva paksusega, vältides rakkude kattumist või lisandite maskeerimist; Tihendusaines tuleks kasutada võrdset glütserooli ja karbonaatpuhvri segu (0,5 mol/L pH 9.0-9.5). Teiseks, enne fluorestsentsvaatlust tuleks ruumis olevad tuled ja pöördfluorestsentsmikroskoobi valge valgus välja lülitada, et tagada nende viibimine pimedas ruumikeskkonnas. Lõpuks, fluorestsentsvaatluse puhul tuleks vaatlusaega rangelt kontrollida, üldiselt 1-2 tundi korraga, vastasel juhul fluorestsents väheneb ja kaob; Valgusallika reguleerimisel tuleks kanda kaitseprille, et vältida prillide UV-kahjustusi.
4. Pildistamise õige kasutamine. Teadusuuringutes ei nõuta mitte ainult seda, et pöördfluorestsentsmikroskoopia abil oleks võimalik saavutada mitu vaatlust, vaid ka seda, et pöördfluorestsentsmikroskoopia abil oleks võimalik saavutada kujutise jäädvustamine. Pööratud fluorestsentsmikroskoobi süsteem ühendab optilise mikroskoobi arvutiga fotoelektrilise muundamise kaudu, võimaldades mitte ainult mikroskoopilist vaatlust okulaaril, vaid ka reaalajas dünaamilist kujutise vaatlemist, redigeerimist ja salvestamist arvutis.
