Nõuded fluorestsentsmikroskoobi slaidide valmistamisele
(1) Klaasist liug
Slaidi paksus peaks olema vahemikus 0,8 kuni 1,2 mm. Kui alusklaas on liiga paks, neelab see ühelt poolt rohkem valgust, teisest küljest aga ei lase ergastusvalgusel isendile koguneda. Klaasklaas peab olema sile, ühtlase paksusega ja sellel ei tohi olla ilmset spontaanset fluorestsentsi. Mõnikord on vaja kvartsklaasist slaide.
(2) Katteklaas
Katteklaasi paksus on umbes 0,17 mm ja see on sile. Ergastusvalguse suurendamiseks võib kasutada ka häirekatteklaasi. See on spetsiaalselt disainitud katteklaas, millel on mitu kihti ainet (näiteks magneesiumfluoriid), millel on erineva lainepikkusega valgusele erinev interferents. See võib võimaldada fluorestsentsil sujuvalt läbida, samas kui peegeldusergutusvalgus võib proovi ergutada.
(3) Näidis
Koeviilud või muud proovid ei tohiks olla liiga paksud. Kui need on liiga paksud, kulub suurem osa ergastusvalgusest katsekeha alumises osas, samas kui objektiiviläätse poolt otseselt vaadeldav ülemine osa pole täielikult ergastatud. Lisaks võib otsustusvõimet mõjutada rakkude kattumine või lisandi maskeerimine.
(4) Tihendusaine
Tavaliselt kasutatakse kinnitusainena glütseriini, millel ei tohi olla spontaanset fluorestsentsi, see on värvitu ja läbipaistev. Fluorestsentsi heledus on pH 8.{1}}.5 juures suhteliselt hele ja seda ei ole lihtne kiiresti kaduda. Seetõttu kasutatakse tihendusainena tavaliselt võrdset segu glütseroolist ja 0,5 mol/L karbonaatpuhvrist, mille pH on 9.0-9,5.
(5) Peegliõli
Kui kasutate proovide vaatlemiseks tumevälja fluorestsentsmikroskoopi ja õlimikroskoopi, tuleb kasutada peegelõli. Võib kasutada spetsiaalset mittefluorestseeruvat peegliõli või asendada glütserooliga. Võib kasutada ka vedelat parafiini, kuid murdumisnäitaja on madal ja mõjutab veidi pildikvaliteeti.
