Põhjused, miks bakterid tuleb enne mikroskoopia katsetes värvimist fikseerida:
Rakkude tapmine on värvainete värvimiseks lihtsam.
Pange bakterid kleepuma klaasist slaididele ja mitte kergelt veega pesta.
Kinnitamisel on vaja aeglaselt kuivada. Kui protsessi kiirendamine on vajalik, saate seda paar korda kuivatada alkoholilambi leegist kõrgemal. Ärge kuivatage klaasist libisemist enne, kui see soojeneb, vastasel juhul võib see kahjustada bakterite eluviisi
Grammi värvimine ja bakterite mikroskoopiline vaatlus
Eksperimentaalpõhimõte
Grammi värvimise põhimõte: bakterite erinevad reaktsioonid grammi värvimiseni on põhjustatud erinevustest nende rakuseinte koostises ja struktuuris. Gram -positiivsete bakterite rakusein koosneb peamiselt peptidoglükaanide võrgustikust. Etanooliga töötlemisel põhjustab dehüdratsioon pooride suuruse ja võrgustruktuuri läbilaskvuse langust, muutes kristallviolett joodikompleksi välja pesta ja raku sees säilitada keeruliseks. Pärast värvuse ja kontraploriseerimist säilitatakse endiselt esialgse värvaine sinine lilla värv. Gramgatiivsete bakterite rakuseinas olev peptidoglükaani kiht on õhuke ja sellel on kõrge lipiidide sisaldus. Seetõttu lahustub lipiiel etanoolis (või atsetoonis), suurendades rakuseina läbilaskvust ja hõlbustades kristallviolett joodikompleksi pesemist. Pärast kontrasseerimisega värvitakse rakud kontrateini punase värviga. Mikroskoobi kuvamise põhimõte: kaasaegsed tavalised optilised mikroskoobid kasutavad suurendamiseks ja pildistamiseks kahte objektiivisüsteemi komplekti, okulaari ja objektiivi, nii et neid nimetatakse sageli ühendmikroskoobiks. Mikroskoobi optilises süsteemis on objektiivi jõudlus kõige kriitilisem ja naftaläätse suurendamine on kõrgeim, mis on mikrobioloogiliste uuringute jaoks kõige olulisem. Läätsede õli lisamine klaasist liumägi ja läätse vahel on peamiselt valgustuse heleduse suurendamiseks ja mikroskoobi eraldusvõime suurendamiseks. Õli asemel õli kasutamine valguse levimiseks vähendab valguse murdumist või täielikku peegeldust, muutes vaadeldava pildi selgemaks.
