Mitmefotoni laserskaneeriva mikroskoopia plussid ja miinused
Multi-Photon Laser Scanning Microscopy on laserskaneeriva mikroskoobi tehnoloogial põhinev eksperimentaalne meetod, mis pakub 3D-vaatlusel rohkem **optilist sektsioonimisvõimalust. Mitmefotoni fluorestsentsi ergastusmeetod kasutab punase või infrapuna-lähedase valguse pikki lainepikkusi, et saada proovidest kõrge eraldusvõimega fluorestsentskujutised, kus aktiivsed proovid hukkuvad minimaalselt, muutes selle sobivaks elusrakkude, eriti paksude eluskudede, nagu ajulõigud, embrüod, pildistamiseks. terved elundid ja isegi terved organismid.
Eelised on järgmised:
1, punase valguse või infrapunavalguse ergastuse kasutamine, valguse hajumine on väike(hajutamineväikeosakesed ja pöördsuhte neljanda astme lainepikkus).
2, ei vaja nööpnõela auku, suudab pildistamise ristlõikelt koguda rohkem hajutatud footoneid.
3, nööpnõel ei suuda eristada hajutatud footoneid, mida kiirgavad fookusest väljas või fookuspiirkonnas, mitme fotoni süvapildi signaali-müra suhe on hea.
4, ühe fotoni ultraviolettkiirguse või nähtava valguse ergastus, mida kasutatakse valgusvihus, et jõuda fookustasandini, enne kui proov imendub ja nõrgeneb, ei ole lihtne sügavale ergastamiseks.
5, bioloogilise mikroskoobi vaatlusel * esimene kaalutlus on mitte kahjustada organismi enda aktiivset seisundit, säilitada vee, ioonide kontsentratsiooni, hapniku ja toitainete ringlust. Valgusvaatluste korral peab nii soojus- kui ka footonenergia jääma rakusse, ilma et see kahjustaks kiirguse hulka, valgusenergiat.
6, mitme fotoni mikroskoobil on ka palju eeliseid. Nagu kolmemõõtmeline eraldusvõime, sügavus sissetungimise, hajumise tõhususe, taustvalguse, signaali-müra suhe, juhtimine jne, on varasemad lasermikroskoobid, millel ei ole või on võrreldamatuid omadusi.
Mitme fotoni konfokaalset laserskaneerivat mikroskoopi on laiendatud erinevatesse uurimis- ja rakendusvaldkondadesse. See on võimeline kolmemõõtmeliselt mittepurustavalt jälgima proove nende loomulikus olekus ning võib parandada süsteemi eraldusvõimet ja signaali-müra suhet. Kasutades materjali omaduste muutumist pärast multifotoni ergastamist, on võimalik saavutada ka kolmemõõtmeline kõrgusandmete salvestamine ja kolmemõõtmeline mikrotööstus igas suunas, millel on kõrge rakendusväärtus. Võib arvata, et masinate, materjalide, lasertehnoloogia ja muude mitmefotoonse konfokaalse mikroskoopiaga seotud tehnoloogiate edasiarendamisel on multifotoonse konfokaalse laserskaneeriva mikroskoobi areng ja laiem rakendus.
Puudused on järgmised:
1, ainult fluorestsentskujutis.
2, kui proov sisaldab kromofoore, mis võivad ergastavat valgust neelata, nagu näitekspigmendid, näidisvõib olla termiliselt kahjustatud.
3, eraldusvõimet on veidi vähendatud, kuigiseda saab parandada konfokaalse ava samaaegse kasutamisega, agatekib signaali kadu.
4. Mitmefotoonse skaneeriva mikroskoopia maksumus on kallite ülikiirete laserite piiratuse tõttu kõrge.
