Fluorestsentsmikroskoobi põhimõtted ja struktuurilised tunnused
Fluorestsentsmikroskoop kasutab väga tõhusat punktivalgustit, et eraldada valguse teatud lainepikkust (näiteks ultraviolettvalgust 3650 või lilla sinine tuli 4200) läbi värvifiltrisüsteemi kui ergutusvalgust, mis erutab proovide fluorestsentsiaineid proovides, et eraldada erinevaid fluorestsentsi värve, ja vaatleb seejärel objektiivse lentide ja silmapaistvuse suurendamise kaudu. Sel moel, isegi tugeva taustaga nõrga fluorestsentsi korral, on seda lihtne ära tunda ja sellel on kõrge tundlikkus. Seda kasutatakse peamiselt raku struktuuri, funktsiooni ja keemilise koostise uurimiseks. Fluorestsentsmikroskoobi põhistruktuur koosneb tavalisest optilisest mikroskoobist ja mõnest lisaseadmest, näiteks fluorestsentsvalgust, ergastusfilter, kahevärviline tala splitter ja blokeeriv filter. Fluorestsentsvalgusallikas - kasutab tavaliselt ülikõrge rõhu elavhõbeda lampe ({50-200 w), mis võib eraldada erinevate lainepikkuste valgust, kuid igal fluorestsents -ainel on ergastuse valguse lainepikkus, mis tekitab tugevat fluorestsentsi. Seetõttu tuleb lisada ergastusfiltrid (tavaliselt ultraviolettkiirguse, lilla, sinise ja rohelise ergastusfiltrid), et vaid teatud lainepikkus erutusvalgust saaks proovist läbi ja kiirgada, absorbeerides samal ajal kogu muud valgust. Pärast ergutusvalgusega kiiritamist kiirgab iga aine nähtavat fluorestsentsi lainepikkusega, mis on pikem kui kiirituslainepikkus väga lühikese aja jooksul. Fluorestsentsil on spetsiifilisus ja see on üldiselt nõrgem kui ergastusvalgus. Spetsiifilise fluorestsentsi jälgimiseks tuleb objektiivi taha lisada blokeeriv (või mahasurumine) filter. Selle funktsioonid on kahesugused: esiteks, et imada ja blokeerida okulaari sisenemise ergutusvalgust, et vältida fluorestsentsi häirimist ja silmade kahjustamist; Teiseks, et valida ja võimaldada spetsiifilist fluorestsentsi läbimist, näidates konkreetset fluorestsentsvärvi. Koos tuleb kasutada kahte tüüpi filtreid.
