Optilise ja elektronmikroskoopia proovide ettevalmistamise meetodid
Mikroskoopilised valmistamismeetodid hõlmavad üldiselt nelja kategooriat: sektsioonide meetod, kogu kinnitusmeetod, määrimismeetod ja tableti valmistamise meetod.
① Viilutamise meetod. Optilise mikroskoobi viilu paksus on vahemikus 2 kuni 25 mikronit. Üldiselt on loomse ja taimse materjali jaoks sobiv viilu paksus umbes 10 mikronit. Jaotusmeetodid varieeruvad olenevalt manuskandjast. Tavaliselt kasutatakse parafiini jagamise meetodit, puuvillakolloidi lõikamise meetodit, külmutatud lõikamise meetodit ja etüleenglükoolmetakrülaadi meetodit (edaspidi GMA meetod). Parafiini lõikamise meetod sisaldab selliseid samme nagu fikseerimine, kinnistamine, lõikamine, värvimine, dehüdratsioon ja paigaldamine. Võti on kinnistada bioloogiline materjal parafiini, kasutada parafiini toena ja lõigata vahaplokki sukeldatud bioloogiline materjal ideaalseteks õhukesteks viiludeks. Toimimisprotsess on: fikseerimine → veega pesemine → alkoholi dehüdratsioon samm-sammult madalast kontsentratsioonist kõrge kontsentratsioonini → ksüleeni läbipaistvus → vaha kastmine → kinnistamine → sektsioonide lõikamine → plaaster → ksüleeni vahatamine → samm-sammult alkoholitöötlus kõrgest kontsentratsioonist madala kontsentratsioonini. Lõpuks läheb see üle veele → värvimine → astmeline veetustamine madalast kontsentratsioonist kõrge kontsentratsiooniga alkoholile → ksüleeni läbipaistvus → vaiguliimi tihendamine. Põhietapid on kõigi tootmistehnikate puhul samad.
②Integraalne tihendusmeetod. Üksikute rakkude, tillukeste organismide või hajutatud elundite jaoks mõeldud terve paigaldusmeetod. See meetod nõuab ka erinevaid fikseerimise, värvimise, dehüdratsiooni, läbipaistvuse ja paigaldamise etappe. Seda meetodit kasutatakse parameetsia ja putukate suuosade valmistamiseks.
③ Määrimismeetod. Valmistamismeetod, mille puhul kergesti hajutavad bioloogilised proovid laotatakse klaasklaasile. Üks näide on vereproov.
④ Tahvelarvuti pressimise meetod. Asetage looduslikud ja kergesti hajuvad kuded või kuded, mis pärast töötlemist kergesti hajuvad, nagu loomade spermatotsüüdid ja juureotsa rakud, alusklaasile, lisage katteklaas ja purustage kude jõuga, et muuta rakud või rakud sees. levitada ühte tootmismeetodi kihti. Pressimismeetodit kasutatakse sageli kromosoomide vaatlemiseks, mis on tavaliselt värvitud magenta atsetaadi, samblikupunase ja karboolfuksiiniga.
