PH-meeter – Söötme pH määramine ja reguleerimine
Kõiki mikroorganisme mõjutab nende elukeskkonna pH. Sageli ahendab selektiivsete liikide olemasolu pH vahemikku, milles nad kasvavad. Mõnikord võib kasvuvaliku tegurina toimida ka söötme happesus või aluselisus. Biokeemiliste katsesöötmete puhul on aga pH vahemik, milles mikroorganismid avaldavad substraadis tk aktiivsust, kitsam kui kasvuks vajalik pH vahemik: seetõttu on oluline reguleerida söötme pH oodatud vahemikku. Kui laboris valmistatakse sööde vastavalt söötme koostisele, tuleb pH-d kontrollida ja reguleerida. Tuleb märkida, et isegi tootja poolt pakutava valmis sünteetilise veetustatud söötme puhul (eriti mõne dehüdreeritud põhisöötme puhul) tuleb pärast katsesöötme valmistamist mõõta lõplik pH.
Kõige täpsem viis keskkonna pH mõõtmiseks on pH-meeter. Enne kasutamist tuleb see kalibreerida teadaoleva pH-ga standardpuhverlahusega (tavaliselt pH on 4 kuni 7). Loputage pH-meetri elektrood destilleeritud veega ja kastke see keeduklaasi söötmesse ning seejärel lugege pH-meetri skaalalt söötme pH. Iga tootja annab üksikasjalikud juhised igat tüüpi pH-meetri kohta.
Kultuurisöötme valmistamisel saab pH-d kergesti reguleerida mehaanilise segamisega pH-meetri abil. Kultuurisööde tuleks valmistada anumas (näiteks suures keeduklaasis), mida saab pidevalt segada. või teflonpakendis magnetid. Agarit sisaldava söötme pH-d tuleb pärast sulatamist reguleerida, mida on lihtne teha soojendatava magnetsegistiga. pH reguleerimisel kasutage pH-meetri esmalt kalibreerimiseks standardset puhverlahust, mille pH on teada. Seejärel pange komposiitelektrood ja takistustermomeeter (kui see on olemas) söötmesse, lisage aeglaselt sobiv kogus vesinikkloriidhapet ja naatriumhüdroksiidi keeduklaasi otsast elektroodist eemale, et keskkond saavutaks ja säilitaks vajaliku pH.
PH-meetri temperatuuri kompenseerimisel tuleks arvesse võtta temperatuuri mõju elektroodisüsteemile: teatud lahjendustes ja söötmetes muutub pH temperatuuriga oluliselt. Vedelate söötmete ja lahjenduste puhul saab pH-d tavaliselt reguleerida ja mõõta kas 25 kraadi juures või temperatuuril, mille juures neid kasutatakse.
Agarisöötme pH-d tuleb pärast lahustamist reguleerida ja lahustumistemperatuur on üle 45 kraadi: seetõttu tuleks tahke söötme pH määrata selle kasutustemperatuuril. Sel ajal tuleks kasutada lameda peaga komposiitelektroodi ja pH-meetri temperatuuri kompenseerimine tuleks käsitsi kalibreerida. Kui kultiveerimissöötme valmistamisel tehakse kindlaks, et söötme pH on sulamis- ja tahkumisolekus erinev, tähendab see pH reguleerimise viga.
Samuti võib ettevalmistatud sööde kuumsteriliseerimisel (nt autoklaavimisel) samuti pH muutuda. Dehüdreeritud söötme puhul on tootja sellega arvestanud ja tavaliselt pole pH-d vaja reguleerida, kuid kasutatava söötme pH-d tuleks hoolikalt kontrollida. Kui dehüdreeritud agarisöötme pH-d tuleb uuesti lahustamise või valmistamise ajal reguleerida, on parem seda pärast steriliseerimisetappi reguleerida steriliseeritud vesinikkloriidhappe ja naatriumhüdroksiidi lahusega, et vältida söötme ülekuumenemist. Erinevate toorainete või ravimitega söötmete valmistamisel tuleb pärast autoklaavimist kontrollida söötmete pH-d. Lisaks, kui leitakse, et söötme pH muutub iga autoklaavi järel samaks, saab söötme valmistamisel pH-d sobivalt reguleerida. Siiski on pärast steriliseerimist vaja kindlaks määrata söötme lõplik pH.
