Baktereid tuleks jälgida optilise mikroskoobi abil
Objektide suurendamise ja vaatlemise täppisinstrumentina saavad optilised mikroskoobid vaadelda erinevat tüüpi proove. Kasutajad sellistes tööstusharudes nagu mikroobiuuringud, taimeuuringud ja loomauuringud peavad nägema bakterite suuruse taset. Seega, millist mikroskoopi tuleks selliste proovide vaatlemisel kasutada? See artikkel sisaldab üksikasjalikku analüüsi.
Vastust sellele küsimusele saab arutada selliste aspektide põhjal nagu bakterikeha suurus, inimsilma ja mikroskoobi eraldusvõime.
1. Bakterikehade suurus on üldiselt mikromeetri skaalal, võttes näiteks Escherichia coli: pikkus on umbes 1 um ja laius on umbes 0, 5 um.
2. Eraldusvõime viitab väikesele kaugusele kahe objektipunkti vahel, mida saab selgelt eristada.
Mikroskoobi eraldusvõime viitab väikesele kaugusele kahe objekti punkti vahel, mida saab pärast mikroskoobi suurendamist ja pildistamist selgelt eristada.
Instrumendi eraldusvõime viitab selle võimele anda teavet mõõdetava objekti mikrostruktuuri kohta. Mida kõrgem on eraldusvõime, seda üksikasjalikum on teave. Võimenduspiiri ületavat võimendust nimetatakse kehtetuks võimenduseks, mis ei saa anda struktuuri kohta täpsemat teavet.
3. Inimsilma eraldusvõime on 0,1 mm, mis tähendab, et piisava valguse ja 1 jala kaugusel on minimaalne kaugus, mida inimsilm suudab kahe punkti vahel eristada, 0,1 mm .
4. Kokkuvõttes peab bakterite esinemise nägemiseks suurendus olema vähemalt 0,1 mm ÷ 0,5 um=1000 ÷ 5=200 korda. Selle suurenduse juures on aga nähtud bakterid (Escherichia coli) vaid väike täpp ja täpsema struktuuriinfo nägemiseks on vaja mikroskoobi suurendust suurendada.
5. Tavalise optilise mikroskoobi eraldusvõime on piiratud nähtava valguse lainepikkusega (390-770nm) ja üldjuhul ei ületa see 1000 korda, mis on tavalise optilise mikroskoobi võimenduspiir. Üle 1000-kordne suurendus ei saa anda üksikasjalikumat struktuuriteavet, mis jääb ebaefektiivse võimenduse piiresse.
6. Elektronmikroskoobi suurendus võib ulatuda 800 000-kordseks ja selle põhiprintsiip on sama, mis tavalisel optilisel mikroskoobil, mis tekitab kõrge rõhu kaudu lühikese lainepikkusega elektronlaineid.
400 korda (10x, 40x) sisse suumides näete vaevu baktereid, kuid need on vaid nõela otsa suurused, nagu väikesed täpid. Üldiselt suumime me vaatlemiseks ikkagi 1000 korda (10x, 100x) ja sel ajal on bakterite välimus veel selgelt näha, isegi pärast lipukate spetsiaalset värvimist. 1000 korda suurendamiseks on vaja kasutada õliläätse. Niinimetatud õlilääts viitab seedriõli tilga tilgutamisele objektiiviläätse ja katteklaasi vahele. Seedriõli valguse murdumisnäitaja on kõrgem kui õhul, nii et saab kasutada suuremat suurendust.
10x ja 40x näitavad, et objektiivi suurendatakse 10x ja 40x. Okulaari suurendus korrutatakse objektiivi suurendusega, et saada selle mikroskoobi kogusuurendus. Keskkooli mikroskoobi okulaari ja objektiivi saab vahetada ning okulaar on tavaliselt 5x või 10x. Väikese mikroskoobi okulaar on tavaliselt vaid 10x ja seda on uuritud E. coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis ja Bacillus megaterium (kasutatakse eoste vaatlemiseks).
