Mikroskoobi slaidide valmistamise meetod
Mikroskoobi slaidide valmistamiseks on kolm meetodit:
1. Määri meetod
Smear meetod on valmistamismeetod, mille käigus materjal jaotatakse objektiklaasile ühtlaselt.
Määrimaterjalide hulka kuuluvad üherakulised organismid, väikesed vetikad, veri, bakterikultuurid, taimede ja loomade lahtised kuded, sperma pesad, tolmukad jne.
Määrimisel tuleb tähelepanu pöörata:
(1) Liumägi peab olema puhas.
(2) Liumägi tuleks hoida tasapinnaliselt.
3) Kate peab olema ühtlane. Kandke kattevedeliku tilk slaidi keskelt paremale ja ajage see hästi laiali lahutusnoa või hambaorku vms teraga.
4) Kate peaks olema õhuke. Kasutage tõukurina teist slaidi, lükake tilga lahuse abil õrnalt paremalt vasakule piki alusklaasi pinda (nurk kahe slaidi vahel peaks olema 30-45 kraadi) ja kandke ühtlaselt õhuke kiht.
5) Fikseerimine. Kui on vaja fikseerida, kasutage keemilist fiksaatorit või kuivatavat (bakteriaalset) fikseerimist.
6) Värvimine. Bakterite jaoks kasutage metüleensinist ja vere jaoks Racheli plekki. Värvimislahus peaks katma kogu kaetud pinna.
7) Loputage. Imenda imavale paberile või küpseta kuivaks.
8) Kinnitage kile. Pikaajaliseks säilitamiseks kasutage Kanada puukilet.
2. Kilepressimise meetod
Survekile meetod on bioloogiline materjal, mis asetatakse slaidi ja kattelehe vahele, rakendades teatud survet, pressitakse koerakud ettevalmistusmeetodil lahti.
(1) võtke materjali. Rakkude jagunemise jälgimine, rakkude jagunemine tuleks materjalideks valida ülevoolavad, värsked koerakud. Nagu juureotsad, varreotsa meristemaatiline kude, luuüdirakud, tolmukad (õietolmu emarakud). Spermapesa (spermatogoonia) ja nii edasi.
(2) Fikseerimine. Materjali fikseerimise saab määrata vastavalt vajadusele, kohe pärast materjali surve filmi vaatlust, ei saa teha eraldi fikseeritud töötlemist (ja värvimist sünkroonselt); materjali võtta ei ole kohe pärast ülevaatust, materjali saab fikseerida fiksaatoriga (üldiselt alkoholatsetaatfiksaatoriga). Fikseeritud 2 ~ 24 tundi (olenevalt materjalist) pärast 95% etanooliga pesemist, konserveeritud 70% etanoolis, ooterežiim.
(3) Dissotsiatsioon. Rakke ei ole lihtne hajutada materjali hüdrolüüsi eralduslahusega (nagu 1N HCl või vesinikkloriidhape alkoholilahusega), üldtöötlusega 6 ~ 20 min, pärast dissotsiatsiooni ja veega loputamist enne värvimist.
(4) Värvimine. Seal on palju erinevaid plekke. Magenta atsetaadi värvimislahusega värvimiseks kasutatakse tavaliselt kromosoomide vaatlemist.
(5) Kilepressimine. Asetage materjal objektiklaasile, lisage tilk vett või peitsilahust, katke katteklaas ja vajutage pöidlaga õrnalt slaidi.
(6) Vaatlus. Pärast kile vajutamist saab seda mikroskoobi all jälgida.
