Laser-konfokaalne skaneeriv mikroskoop
Laser-konfokaalne skaneeriv mikroskoop (laser-konfokaalne skaneeriv mikroskoop), kasutades laserit skaneeriva valgusallikana, kiiret skaneerimist ja pildistamist punkt-punktilt, rida-realt ja pind-realt, skaneerival laser- ja fluorestsentskollektsioonil on ühine objektiiv ja objektiiv. skaneerib laservalguse fookuspunkti, mis on ühtlasi mateeria hetkepildistamise punkt. Kuna laserkiire lainepikkus on lühike ja kiir väga õhuke, on konfokaalse laserskaneeriva mikroskoobi eraldusvõime kõrge, mis on umbes 3 korda suurem kui tavalisel optilisel mikroskoobil. Pärast süsteemi ühekordset teravustamist piirdub skaneerimine proovi ühe tasapinnaga. Kui teravustamissügavus on erinev, on võimalik saada proovi erineva sügavustasemega pilte. See pilditeave salvestatakse arvutisse. Arvutianalüüsi ja simulatsiooni abil saab kuvada rakuproovi kolmemõõtmelise struktuuri.
Miks on vaja konfokaalset mikroskoopi?
1. Pärast meie suurte eelkäijate jõupingutusi ja täiustusi on optiline mikroskoop saavutanud täiuslikkuse. Tegelikult saavad tavalised mikroskoobid meile lihtsalt ja kiiresti ilusaid mikroskoopilisi pilte anda. Siiski juhtus sündmus, mis tõi sellesse peaaegu täiuslikku mikroskoobimaailma revolutsioonilise uuenduse, milleks on "laserskaneeriva konfokaalse mikroskoobi" leiutis. Selle uut tüüpi mikroskoobi eripäraks on see, et see kasutab optilist süsteemi, mis eraldab pilditeabe ainult pinnalt, kuhu fookus on koondunud, ja taastab saadud teabe kujutise mällu, muutes fookust, nii et täielikku 3D-teavet saab kuvada. saadud. Karm pilt intelligentsusest. Selle meetodi abil on võimalik hõlpsasti saada teavet pinnakuju kohta, mida tavalise mikroskoobiga ei saa kinnitada. Lisaks on tavaliste optiliste mikroskoopide puhul "lahutusvõime suurendamine" ja "teravustamise sügavuse süvendamine" vastuolulised tingimused, eriti suure suurenduse korral on see vastuolu rohkem silmatorkav, kuid konfokaalsete mikroskoopide puhul on see probleem lihtsalt lahendatav.
2. Konfokaalse optilise süsteemi eelised
Laserkonfokaalse mikroskoobi skemaatiline diagramm
Konfokaalne optiline süsteem teostab proovi punktvalgustust ning peegeldunud valgust võtab vastu ka punktretseptor. Kui proov asetatakse fookusasendisse, võib peaaegu kogu peegeldunud valgus jõuda fotoretseptorini ja kui proov on fookusest väljas, ei jõua peegeldunud valgus fotoretseptorisse. See tähendab, et konfokaalses optilises süsteemis väljastatakse ainult fookuspunktiga kattuv pilt ning valguslaigud ja kasutu hajutatud valgus on varjestatud.
3. Miks kasutada laserit?
Konfokaalses optilises süsteemis valgustatakse proov punktis ja peegeldunud valgust võtab vastu ka punktfotoretseptor. Seetõttu on vaja punktvalgusallikat. Laserid on väga punktvalgusallikad. Enamasti kasutatakse konfokaalsete mikroskoopide valgusallikatena laservalgusallikaid. Lisaks on laseri monokromaatilisuse, suundumuse ja suurepärase kiire kuju omadused samuti olulised põhjused selle laialdaseks kasutuselevõtuks.
4. Võimalik on kiirel skaneerimisel põhinev reaalajas jälgimine
Laserskannimiseks kasutab horisontaalsuund akustilist optilist deflektorit (AO element) ja vertikaalsuunas servo-elektrooniliselt juhitavat kiirskaneerimispeeglit (Servo Galvano-peegel). Kuna akusto-optilisel läbipaindeseadmel pole mehaanilist vibratsiooniosa, saab see teostada kiiret skaneerimist ja võimalik on monitori ekraanil reaalajas jälgimine. See kiire pildistamine on väga oluline element, mis mõjutab otseselt teravustamise ja asukoha otsimise kiirust.
