Sissejuhatus multifotoonsete laserskaneerivate mikroskoopide eelistesse ja puudustesse
Mitmefotoni laserskaneeriva mikroskoobi eelised:
1. Punase või infrapunavalguse poolt ergastatud valguse hajumine on väike ja väikeste osakeste hajumine on pöördvõrdeline lainepikkuse neljanda astmega.
2. Pildistamise ristlõikest saab koguda rohkem hajutatud footoneid- ilma aukudeta.
3. Nõelaugud ei suuda eristada hajutatud footoneid, mis kiirguvad defokuseeritud või fookusaladelt ning multifotonitel on süvapildistamisel parem signaali-/-müra suhe.
4. Ühe footoni ergastamiseks kasutatav ultraviolett- või nähtav valgus neeldub ja nõrgeneb proovis kergesti enne, kui kiir jõuab fookustasandini, mistõttu on sügavate kihtide ergastamine raskendatud.
5. Bioloogilise mikroskoopia vaatluse puhul on esmatähtis mitte kahjustada organismi enda aktiivset seisundit, säilitada veeringlus, ioonide kontsentratsioon, hapniku ja toitainete ringlus. Valgusvaatluse valdkonnas peab nii soojus- kui footonienergia jääma kiirgusdoosi piiresse ja valgusenergia, mis ei kahjusta rakke.
6. Multifotonmikroskoopial on palju eeliseid. Kolmemõõtmelise eraldusvõime, sügavusele tungimise, hajumise tõhususe, taustvalguse, signaali-/-müra suhte, juhtimise jms osas on omadusi, mida varasematel lasermikroskoobidel ei ole või mida ei saa ületada
Mitmefotoni laserskaneeriva mikroskoobi puudused:
1. Ainult fluorestsentskuvamiseks.
2. Kui proov sisaldab kromofoore, mis võivad ergastavat valgust neelata, võib proov saada termiliselt kahjustada.
3. Eraldusvõime on veidi vähenenud, kuigi seda saab parandada, kasutades samaaegselt konfokaalseid väikseid auke, on signaali kadu.
4. Kallite ülikiirete laserite piirangute tõttu on multifotoni skaneerivate mikroskoopide hind suhteliselt kõrge.
