Laserskaneeriva multifotoni mikroskoobi paremad eelised
Laser-skaneeriv multifotoonmikroskoop on optilise mikroskoobi oluline täiustus, mis näitab peamiselt seda, et see suudab jälgida elusrakkude, fikseeritud rakkude ja kudede süvastruktuuri ning saada selge ja terava mitmekihilise Z-tasandi struktuuri, st optilised viilud. , mida saab kasutada katsekehade kolmemõõtmelise tahke struktuuri konstrueerimiseks. Konfokaalne mikroskoop kasutab laservalgusallikat, mis täidab pärast laiendamist kogu objektiiviläätse tagumise fookustasandi ja seejärel läbib objektiivi läätsesüsteemi, et koonduda proovi fookustasandil väga väikesteks punktideks. Objektiivi objektiivi numbrilise ava järgi on eredaima valgustuspunkti läbimõõt umbes 0,25 ~ 0,8 μm ja sügavus umbes 0,5 ~ 1,5 μm .. Kopolümerisatsiooni fookuse suurus sõltub mikroskoobi konstruktsioonist, laseri lainepikkusest, objektiivi omadustest, skaneerimisüksuse oleku seadistusest ja proovi omadustest. Mikroskoobi valgustusulatus ja teravussügavus on väga suured, samas kui konfokaalse mikroskoobi valgustus on koondunud fookustasandile * *. Konfokaalse mikroskoobi kõige põhilisem eelis on see, et sellega saab teha peeneid optilisi viile paksudest fluorestseeruvatest proovidest (mis võib ulatuda 50 μm või rohkem) ja viilude paksus on umbes 0,5–1,5 μm. Optiliste lõikude kujutiste seeriat saab saada, liigutades proovi mikroskoobi Z-telje samm-mootori abil üles ja alla. Kujutise teabe hankimist juhitakse esimesel tasapinnal ja seda ei sega proovi teistest positsioonidest pärit signaalid. Pärast tausta fluorestsentsi mõju eemaldamist ja signaali-müra suhte suurendamist on konfokaalse pildi kontrastsus ja eraldusvõime ilmselgelt paranenud võrreldes traditsioonilise väljavalgustuse fluorestsentspildiga. Paljudes proovides on paljud keerulised konstruktsioonikomponendid omavahel põimunud, moodustades keeruka süsteemi, kuid kui on kogutud piisavalt optilisi sektsioone, saame need tarkvara abil kolmemõõtmeliselt rekonstrueerida. Seda eksperimentaalset meetodit on laialdaselt kasutatud bioloogilistes uuringutes, et selgitada rakkude või kudede vahelisi keerulisi struktuurseid ja funktsionaalseid seoseid.
