Kuidas lugeda fluorestsentsmikroskoopia tulemusi, kasutades apoptoosi tuvastamiseks tunnelit
1. Pöörake tulemuste vaatlemisel tähelepanu kolmele punktile, epiprojektsioonimeetodile, eraldusvõime projektsioonile ja filtritöötlusele. Täpsemalt:
Valgustusmeetod on tavaliselt episkoopiline, see tähendab, et valgusallikas projitseeritakse proovile läbi objektiivi;
Valgusallikaks on ultraviolettvalgus, lainepikkus on lühem ja eraldusvõime kõrgem kui tavalistel mikroskoopidel;
Spetsiaalseid filtreid on kaks, valgusallika ees olevat filtrit kasutatakse nähtava valguse väljastamiseks ning okulaari ja objektiiviläätse vahel asuvat ultraviolettkiirte filtreerimiseks, et kaitsta inimese silmi.
Teiseks, fluorestsentsmikroskoop, mida kasutatakse apoptoosi mõõtmiseks tunneli abil, on samuti omamoodi optiline mikroskoop, peamine erinevus seisneb selles, et nende kahe ergastuslainepikkused on erinevad. See määrab fluorestsentsmikroskoobi ja tavalise optilise mikroskoobi erinevuse struktuuri ja kasutuse osas. Fluorestsentsmikroskoopia on immunofluorestsentstsütokeemia oluline tööriist. See koosneb põhikomponentidest, nagu valgusallikas, filtriplaadi süsteem ja optiline süsteem. See on teatud valguse lainepikkuse kasutamine proovi ergutamiseks fluorestsentsi kiirgamiseks ja proovi fluorestsentskujutise jälgimine objektiivi ja okulaari süsteemi võimendamise teel.
3. Fluorestsentssupresseeritud filterplaat apoptoosi mõõtmiseks tunnelis Supresseeritud filterplaadi ülesanne on täielikult blokeerida ergastava valguse läbipääs ja tagada fluorestsents vastavas lainepikkuste vahemikus. Vastavalt ergutusfiltriplaadile kasutatakse tavaliselt järgmist kolme tüüpi pressitud filterplaate:
Ultraviolettvalgust vajutav filterplaat: see võib läbida nähtavat valgust ja blokeerida ultraviolettvalguse läbimise. Saab kombineerida UG-1 või UG-5-ga. Tavaliselt kasutatav GG-3K430 või GG-6K460.
Lillasinine valgust summutav filterplaat: suudab läbida valgust lainepikkusega üle 510 nm (rohelisest punaseni) ja seda saab kombineerida BG-ga-12. Tavaliselt kasutatakse OG-4K510 või OG-1K530.
Ultraviolettvalgust suruv filterplaat: suudab läbida valgust lainepikkusega üle 460 nm (sinine kuni punane), saab kombineerida BG-3-ga, tavaliselt kasutatav OG-11K470AK 490, K510.
