Kas olete kunagi aru saanud faasikontrastmikroskoopia põhiprintsiipidest?
Faasikontrastmikroskoobi leiutas Hollandi teadlane Zernike 1935. aastal värvimata isendite vaatlemiseks. Elusrakkude ja värvimata bioloogiliste proovide puhul iga rakuosa murdumisnäitaja ja mikrostruktuuri paksuse erinevuse tõttu valguslaine läbimisel lainepikkus ja amplituud ei muutu, muutub ainult faas (amplituudide erinevus). ), mis on inimsilmale nähtamatu. jälgida. Faasikontrastmikroskoop muudab faasierinevust ning kasutab valguse difraktsiooni ja interferentsi nähtusi, et muuta faasierinevus amplituudide erinevuseks, et jälgida elusaid rakke ja värvimata proove. Faaskontrastmikroskoobi ja tavalise mikroskoobi erinevus seisneb selles, et muutuva diafragma asemel kasutatakse rõngakujulist diafragmat, tavalise objektiiviläätse asemel kasutatakse faasiplaadiga objektiivi ja koaksiaalsuseks on teleskoop.
Faaskontrastmikroskoopia põhiprintsiibid:
Kasutades objekti erinevate konstruktsioonikomponentide murdumisnäitaja ja paksuse erinevust, teisendatakse objekti erinevaid osi läbiv optilise tee erinevus amplituudi erinevuseks (valguse intensiivsus) ja läbi rõngakujulise diafragmaga kondensaatori läätse ja faaside erinevus faasiplaadiga Objektiivilääts realiseerib vaatlusmikroskoobi. Seda kasutatakse peamiselt elusrakkude või värvimata koelõikude vaatlemiseks ning mõnikord saab seda kasutada ka värvitud proovide vaatlemiseks, millel puudub kontrast.
Proovi läbiva nähtava valguse optilise tee erinevus muudetakse amplituudide erinevuseks, parandades seeläbi erinevate struktuuride kontrasti ja muutes erinevad struktuurid selgelt nähtavaks. Valgus murdub pärast proovi läbimist, kaldub kõrvale algsest optilisest rajast ja hilineb 1/4λ (lainepikkuse) võrra. Kui seda suurendada või vähendada 1/4λ võrra, muutub optilise tee erinevus 1/2λ ja kaks kiirt segavad pärast valgustelge Tugevdage, suurendage või vähendage amplituudi, parandage kontrasti.
Faasikontrastmikroskoobil on kaks funktsiooni, mida teistel mikroskoopidel ei ole: ① eraldab otsevalguse (vaatevälja taustvalgus) objekti poolt hajutatud valgusest; ② see eemaldab faasist umbes poole lainepikkusest, nii et see ei saa interakteeruda, mille tulemuseks on intensiivsuse muutumine.
