Fluorestsentsmikroskoobid võib valgustee põhimõtte järgi jagada kahte tüüpi:
1. Läbilaskev fluorestsentsmikroskoop
Vanemate fluorestsentsmikroskoopide puhul läbib ergastusvalgusallikas proovi materjali läbi kondensaatori, et ergutada fluorestsentsi. Eeliseks on see, et fluorestsents on madalal suurendusel tugev, miinuseks aga see, et suurenduse suurenedes fluorestsents nõrgeneb. Seega sobib see ainult suuremate proovimaterjalide vaatlemiseks.
2.Epifluorestsentsmikroskoopia
Ergastusvalgus langeb objektiivist allapoole proovi pinnale, st sama objektiivi kasutatakse nii valgustuskondensaatorina kui ka fluorestsentsi kogumise objektiivina.
Optilisele teele, mis on optilise telje suhtes 45o nurga all, on vaja lisada dikroonne kiire jaotur (dikroiline peegel). Ergastusvalgus peegeldub objektiivil ja kontsentreeritakse proovile. Proovi tekitatud fluorestsents peegeldub objektiivi ja katte pinnalt. Slaidi pinnalt peegelduv ergastusvalgus siseneb samal ajal objektiiviläätsesse ja naaseb ergastusvalguse ja fluorestsentsi eraldamiseks dikroilise kiire jaoturisse. Ülejäänud ergastusvalgus neeldub seejärel blokeerivasse filtrisse. Kui kasutate erinevaid ergastusfiltri/kahevärvilise kiirjaoturi/blokeeriva filtri kombinatsiooni, saate rahuldada erinevate fluorestsentsreaktsiooniproduktide vajadused.
Seda tüüpi fluorestsentsmikroskoobi eeliseks on see, et vaateväli on ühtlaselt valgustatud, pilt on selge ja mida suurem on suurendus, seda tugevam on fluorestsents.
Millised on optiliste mikroskoopide peamised kategooriad?
1. Tavaline optiline mikroskoop
Tavalised optilised mikroskoobid koosnevad peamiselt järgmistest osadest: valgustussüsteem, mis hõlmab valgusallikat ja kondensaatorit; optiline suurendussüsteem, mis koosneb objektiivist ja okulaarist. See on mikroskoobi kõige kriitilisem osa ja mõeldud selleks, et vältida liigset sfäärilist aberratsiooni ja kromaatilist aberratsiooni, koosnevad nii okulaar kui ka objektiivi lääts keerukatest läätserühmadest.
2. Laser-konfokaalne skaneeriv mikroskoop
Laserkonfokaalne skaneeriv mikroskoop kõlab väga tipptasemel ja keeruliselt. Tegelikult kasutab see lihtsalt laserit skaneeriva valgusallikana, et kiiresti skaneerida ja pildistada objekte punkt-punktilt, rida-realt ja pind-pinnalt.
Laserkiire lühema lainepikkuse põhjal on kiir ise väga õhuke, mis määrab, et konfokaalse laserskaneeriva mikroskoobi lahutusvõime on kõrge, mis on umbes kolm korda suurem kui tavalisel optilisel mikroskoobil. Seda tüüpi mikroskoopi kasutatakse raku morfoloogia jälgimiseks ja rakusiseste biokeemiliste komponentide kvantitatiivseks analüüsimiseks ja raku morfoloogia mõõtmiseks.
3. Tumevälja mikroskoop
Tumevälja mikroskoobi kondensaatori keskel on valgusplaat, mis ei lase valgustusvalgusel otse objektiivi sattuda. Objektiivi läätsesse pääseb ainult proovilt peegeldunud ja hajutatud valgus. Seetõttu on vaatevälja taust must ja objektide servad heledad.
