(Erinevused (kahefotoni, konfokaalse) fluorestsentsmikroskoopide ja tavaliste mikroskoopide vahel
Fluorestsentsmikroskoop on ultraviolettvalguse kasutamine valgusallikana, mida kasutatakse uuritava objekti kiiritamiseks, nii et objekt kiirgab valgusallikat ning seejärel viiakse objekti vaatlus läbi mikroskoobi all. Seda kasutatakse peamiselt immunofluorestsentsrakkude jaoks, mis koosnevad peamiselt valgusallikast, filtriplaadisüsteemist ja optilisest süsteemist, et jälgida proovide fluorestsentspilti okulaari ja objektiivi suurenduse kaudu. Vaatame fluorestsentsmikroskoopi ja mis vahe on tavalisel optilisel mikroskoobil.
1, valgustusrežiimis
Fluorestsentsmikroskoobi valgustus on üldjuhul langeva tüübiga, st valgusallikas on läbi objektiivi, et katseproovi peale panna.
2, resolutsioonis
Fluorestsentsmikroskoobis kasutatakse valgusallikana ultraviolettvalgust, lainepikkus on suhteliselt lühike, kuid eraldusvõime kõrgem kui tavalisel optilisel mikroskoobil.
3, filtri erinevus
Fluorestsentsmikroskoop on kahe spetsiaalse filtri kasutamine, valgusallika ees kasutatakse nähtava valguse filtreerimiseks, objektiivi ja okulaari vahel ultraviolettvalguse filtreerimiseks, mis võib kaitsta inimsilma.
Fluorestsentsmikroskoop kuulub ka teatud tüüpi optilisse mikroskoopi, peamiselt fluorestsentsmikroskoobi ergastuse lainepikkus on lühike, nii et see viis fluorestsentsmikroskoobi ja tavalise mikroskoobi mitmesuguse struktuuri ehitamise ja kasutamiseni, enamikul on fluorestsentsmikroskoopidel hea nõrga valguse funktsiooni tabamine, nii et äärmiselt nõrk fluorestsents, see on pildistamisvõime ja hea. Koos fluorestsentsmikroskoobi viimaste aastate pideva täiustamisega on ka müra oluliselt vähenenud. Seetõttu on üha enam rakendatud fluorestsentsmikroskoope.
Kahe fotoni fluorestsentsmikroskoobil on palju eeliseid:
(1) Valguse pikemaid lainepikkusi mõjutab hajumine vähem kui lühema lainepikkusega valguse puhul, mis kergesti läbi proovi;
(2) Väljaspool fookustasandit fluorestseeruvaid molekule ei ergutata, et fookustasandile jõuaks rohkem ergastusvalgust, nii et ergastusvalgus võib tungida proovi sügavamale;
3) Lähiinfrapuna valguse pikemad lainepikkused on rakkudele vähem toksilised kui lühemad lainepikkused;
4) Kui kasutate proovi vaatlemiseks kahefootonilist mikroskoopi, ilmnevad fotopleegitamine ja fototoksilisus ainult fookustasandil. Seetõttu on kahe footoni mikroskoobid sobivamad kui ühefootonilised mikroskoobid paksude proovide vaatlemiseks, elusrakkude vaatlemiseks või täppide fotovalgendamise katsete läbiviimiseks.
