Erinevused fluorestsentsmikroskoopia ja konfokaalse mikroskoopia vahel
fluorestsentsmikroskoop
1. fluorestsentsmikroskoop kasutab valguse allikana ultraviolettvalgust, et kiiritavat objekti kiirgada, põhjustades selle fluorestsentsi ja seejärel jälgida objekti kuju ja asukohta mikroskoobi all. Fluorestsentsmikroskoopiat kasutatakse rakkude imendumise, transpordi, jaotuse ja lokaliseerimise uurimiseks. Mõned rakkude ained, näiteks klorofülli, võivad ultraviolettkiirgusega kokkupuutel fluorestseerida; On ka mõned ained, mis ei saa ise fluorestsentsi eraldada, kuid võivad ka fluorestsentsi eraldada fluorestsentsvärvide või fluorestsents -antikehadega ja kiirgata ultraviolettvalgusega. Fluorestsentsmikroskoopia on üks vahendeid selliste ainete kvalitatiivsete ja kvantitatiivsete uuringute jaoks.
2. fluorestsentsmikroskoobi põhimõte:
A) Valgusallikas: valgusallikas kiirgab erinevate lainepikkuste valgust (alates ultraviolettkiirgust kuni infrapunani).
(B) Ergastusfiltri valgusallikas: konkreetse lainepikkuse valguse edastamine, mis võib põhjustada proovis fluorestsentsi, blokeerides samal ajal valguse, mis on põneva fluorestsentsi jaoks kasutu.
C) Fluorestsentsproovid: tavaliselt värvitud fluorestsentspigmentidega.
(D) Blokeerimisfilter: see edastab valikuliselt fluorestsentsi, blokeerides ergutusvalgust, mida proov ei imendu, ja ka fluorestsentsi mõned lainepikkused edastatakse selektiivselt. Mikroskoop, mis kasutab valguse allikana ultraviolettvalgust, et muuta valgustatud objekt fluorestsentsi. Elektronmikroskoobi koondati esmakordselt Knorri ja Haruska poolt Saksamaal Berliinis 1931. aastal. See mikroskoop kasutab kergete talade asemel kiireid elektrontalasid. Elektronvoolu palju lühema lainepikkuse tõttu võrreldes valguselainetega võib elektronmikroskoobi suurendamine ulatuda 8 0 0000 korda, minimaalse eraldusvõime piirmääraga 0,2 nanomeetrit. Skaneeriv elektronmikroskoop, mida kasutati esmakordselt 1963. aastal, võimaldab inimestel näha pisikesi struktuure objektide pinnal.
3. rakenduse ulatus: kasutatakse väikeste objektide piltide suurendamiseks. Üldiselt kasutatakse bioloogia, meditsiini, mikroskoopiliste osakeste jms vaatluste jaoks
konfokaalne mikroskoop
1. Konfokaalne mikroskoop lisab peegeldunud valguse teele poolpeegeldava poolläätse, mis suunab objektiivi läbinud peegeldunud valguse teistes suundades. Selle fookuspunktis on fookuspunktis asuv pin -auguga deflekt ja deflektori taga on fotomajanduslik toru. Võib ette kujutada, et peegeldunud valgus enne ja pärast tuvastamise fookust ei saa keskenduda väikesele augule selle konfokaalse süsteemi kaudu ja see blokeerib deflektor. Nii et fotomeeter mõõdab peegeldunud valguse intensiivsust fookuspunktis.
2. põhimõte: traditsioonilised optilised mikroskoobid kasutavad põlluvalgustiallikaid ja proovi iga punkti pilti mõjutab difraktsioon või naabruses asuvatest punktidest hajutatud tuli; Laseri skaneerimise konfokaalne mikroskoop kasutab laserkiirt, et valgustada augu augu ja moodustada punktvalgusallikas, et skannida proovi iga punkt proovi fookustasapinnal. Proovi valgustatud punkt pildistatakse tuvastamisaukude juures ja pärast pin -augu tuvastamist võetakse seda punkti või joone järgi punkti või joone järgi punkti või külma haakeseadme (CCCD) abil, moodustades kiiresti arvutmonitori ekraanile fluorestsentsipildi. Valgustusauk ja tuvastusauk on konjugaat objektiivi fookustasapinna suhtes. Fookustasapinna punktid on samaaegselt keskendunud valgustusaugule ja emissiooni augule ning fookustasapinnast väljaspool asuvaid punkte ei kujutata tuvastamise augul. Saadud konfokaalne pilt on proovi optiline ristlõige, mis ületab häguste piltide puuduse üldistes mikroskoopides.
