Faasikontrastmikroskoopia silumismeetodid ja sammud
a. Kuhleri valgustussüsteemi reguleerimise põhjal kasutage ereda välja meetodit, et näidis selgelt fokusseerida;
b. Pöörake prožektor asendisse Ph1 ja joondage see pöördalusel oleva skaala joonega. Valige 10-kordse faasikontrastsusega objektiiv ja asendage see vaadeldava läbipaistva prooviga;
c. Eemaldage üks okulaaridest, asendage see tsentreeriva teleskoobiga ja keskenduge kahele vaateväljas olevale kontrastrõngale (objektiivi must kontrastrõngas ja kondensaatorläätse läbilaskvuskontrastrõngas);
d. Vaatevälja kaks erinevusrõngast ei pruugi tingimata kokku langeda. Reguleerige prožektori kahte reguleerimisseadet (vaherõngaste vasaku ja parema positsiooni reguleerimine reguleerimisvarraste ja hõõrdnuppudega eesmise ja tagumise asendi reguleerimiseks), nii et läbipaistev rõngas liigub edasi-tagasi, et langeda kokku musta rõngaga. ;
e. Pärast reguleerimist lülitage tagasi vaatlusokulaarile ja vajutage roheline filter optilisele teele, et jälgida proovi faasierinevust;
f. 20 x ja 40 x objektiividega vaatlemisel tuleks prožektor seada asendisse Ph2 ja 100 x objektiivi kasutamisel tuleks prožektor asendisse Ph3.
Kasutusala: Sobib läbipaistvate, värvimata või värvimata proovide, näiteks erinevate rakkude, eluskudede, värvimata või värvimata koelõikude, veeorganismide jms vaatlemiseks.
Faaskontrastmikroskoobi põhiprintsiip
Kui valgus läbib suhteliselt läbipaistvat proovi, siis valguse lainepikkuses (värvis) ja amplituudis (heleduses) olulist muutust ei toimu. Seetõttu on värvimata proove (näiteks elusrakke) tavalise optilise mikroskoobi all vaadeldes nende morfoloogiat ja sisemist struktuuri sageli raske eristada. Kuid raku erinevate osade murdumisnäitaja ja paksuse erinevuste tõttu on selle proovi läbimisel erinevusi otsese ja hajutatud valguse optilises tees. Kui optiline tee suureneb või väheneb, muutub kiirenevate või mahajäänud valguslainete faas (mille tulemuseks on faaside erinevus). Valguse faasierinevust palja silmaga ei tunneta, kuid faasierinevusmikroskoop saab kasutada oma spetsiaalset seadet - ringikujulist ava ja faasiplaati ning kasutada valguse interferentsi nähtust valguse faasierinevuse muutmiseks amplituudide erinevuseks. (hele ja tume erinevus), mida inimsilm suudab tuvastada. See muudab algselt läbipaistva objekti selgeks valguse ja pimeduse erinevused, suurendab kontrasti ja võimaldab meil selgelt jälgida elusaid rakke ja teatud peenstruktuure rakkude sees, mida tavaliste optiliste mikroskoopide ja tumeväljamikroskoobidega ei saa näha ega selgelt näha.
Faaskontrastmikroskoobi pildistamise põhimõte: optiline allikas võib läbida ainult läbipaistva ümmarguse avaga rõnga, mis seejärel fokusseeritakse valgusvihuks. Kui see valguskiir läbib testitavat objekti, toimub see iga osa erineva optilise tee tõttu erineval määral hälbe (difraktsiooni). Tulenevalt asjaolust, et läbipaistva rõnga moodustatud kujutis langeb kokku faasiplaadil oleva konjugaadi pinnaga ja objektiivi taga oleva fookustasandiga. Seetõttu läbib konjugaadi pinda otsene valgus, mis ei ole hälbinud, samas kui hajutatud valgus, mis on hälbinud, läbib kompenseerivat pinda. Faasiplaadi konjugaadi pinna ja kompensatsioonipinna erinevate omaduste tõttu tekitavad need vastavalt teatud faasierinevuse ja neid kahte osa läbiva valguse intensiivsuse vähenemise. Seejärel koonduvad kaks valguse komplekti läbi tagumise läätse ja liiguvad samal optilisel teel, põhjustades häireid otsese ja hajutatud valguse vahel, muutes faasierinevuse amplituudide erinevuseks. Nii muundatakse faasikontrastmikroskoopia käigus faasierinevus, mida inimsilm ei erista, amplituudierinevuseks (heleduse erinevuseks), mida inimsilm saab eristada läbi värvitu läbipaistva keha valguse.
