Konfokaalse mikroskoopia ja tavapärase optilise mikroskoopia võrdlus
Mikroskoop on peamine tööriist rakkude vaatlemiseks. Erinevate valgusallikate järgi võib selle jagada kahte kategooriasse: optilised mikroskoobid ja elektronmikroskoobid. Esimene kasutab valgusallikana nähtavat valgust (ultraviolettmikroskoop kasutab ultraviolettvalgust), teine aga elektronkiirt valgusallikana. Nii tavalised optilised mikroskoobid kui ka laserkonfokaalsed mikroskoobid kuuluvad optiliste mikroskoopide hulka.
Tavaline optiline mikroskoop
Tavaline bioloogiline mikroskoop koosneb kolmest osast, nimelt: ① valgustussüsteem, sealhulgas valgusallikas ja kondensaator; ② Optiline võimendussüsteem, mis koosneb objektiivist ja okulaarist, on mikroskoobi põhiosa. Sfäärilise ja kromaatilise aberratsiooni kõrvaldamiseks koosnevad nii okulaar kui ka objektiiv keerukatest läätserühmadest Mehaaniline seade, mida kasutatakse materjalide fikseerimiseks ja vaatluse hõlbustamiseks.
Mikroskoobi kujutise selgus ei sõltu mitte ainult selle suurendusest, vaid ka eraldusvõimest. Eraldusvõime viitab mikroskoobi (või sihtmärgist 25 cm kaugusel asuva inimsilma) võimele objekte väikeste intervallidega eristada. Eraldusvõime suurus sõltub valguse lainepikkusest, apertuuriindeksist ja kandja murdumisnäitajast. Seda väljendatakse järgmiselt: R=0.61 λ/NANA=nsin /2, kus n=keskkonna murdumisnäitaja; =ava nurk (nurk, mille all proov avab objektiivi ava), NA=arvuline ava. Kas peegli nurk on alati väiksem kui 180? Seega peab zui maksimaalne väärtus sina/2 jaoks olema väiksem kui 1.
Optiliste läätsede tootmisel kasutatava klaasi murdumisnäitaja on 1.65-1,78 ja mida lähemal on kasutatava kandja murdumisnäitaja klaasi omale, seda parem. Kuivade objektiivide puhul on keskkonnaks õhk ja ava suhe on üldiselt 0.05-0.95; Õlilääts kasutab keskkonnana seedriõli ja ava suhe võib olla 1,5 lähedal.
Tavalise valguse lainepikkus on {{0}}nm, seega ei ole mikroskoobi eraldusvõime väärtus väiksem kui 0,2 μm ja inimsilma eraldusvõime on 0,2 mm. Seetõttu on mikroskoobi disaini maksimaalne suurendus tavaliselt 1000X.
