Optilise mikroskoobi objektide klassifikatsioon
1. Objektiiviläätsede klassifikatsioon:
Objektiivi saab vastavalt erinevatele kasutustingimustele jagada kuivaks objektiiviks ja vedelikkümblusobjektiiviks; nende hulgas võib vedelikukümblusobjektiivi läätsed jagada veekeelestusega objektiiviks ja õlikümblusobjektiiviks (tavaliselt kasutatav suurendus on 90-100 korda).
Erinevate suurenduste järgi saab selle jagada madala suurendusega objektiiviks (vähem kui 10 korda), keskmise suurendusega objektiiviks (umbes 20 korda) ja suure suurendusega objektiiviks (40-65 korda).
Vastavalt aberratsiooni korrigeerimise olukorrale jagatakse see akromaatiliseks objektiiviks (tavaliselt kasutatav objektiiv, mis suudab korrigeerida spektris kahte tüüpi värvivalguse kromaatilist aberratsiooni) ja apokromaatiliseks objektiiviks (objektiiviks, mis võib korrigeerida kromaatilist valgust). kolme tüüpi värvivalguse aberratsioon spektris, mis on kallis ja harva kasutatav).
2. Objektiivi peamised parameetrid:
Objektiivi peamised parameetrid on: suurendus, numbriline ava ja töökaugus.
① Suurendus viitab silmadega nähtava kujutise suuruse ja vastava proovi suuruse suhtele. See viitab pigem pikkuste kui pindalade suhtele. Näide: Suurendustegur on 100×, mis viitab 1 μm pikkusele proovile. Suurendatud pildi pikkus on 100 μm. Kui see arvutatakse pindala järgi, suurendatakse seda 10,000 korda.
Mikroskoobi kogusuurendus on võrdne objektiivi ja okulaari suurenduse korrutisega.
②. Numbrilist ava nimetatakse ka avasuhteks, lühendatult NA või A. See on objektiiviläätse ja kondensaatori peamine parameeter ning see on otseselt võrdeline mikroskoobi eraldusvõimega. Kuivobjektiivide arvuline ava on 0.05-0,95 ja õlikümblusobjektiivide (seedriõli) arvuline ava on 1,25.
③. Töökaugus viitab kaugusele objektiiviläätse eesmise läätse alt kuni proovi katteklaasi ülaosani, kui vaadeldav proov on kõige selgem. Objektiivi töökaugus on seotud objektiivi fookuskaugusega. Mida pikem on objektiivi fookuskaugus, seda väiksem on suurendus ja seda pikem on selle töökaugus. Näide: 10x objektiiv on tähistatud väärtustega 10/0.25 ja 160/0.17, kus 10 on suurendus objektiivi objektiiv; 0,25 on numbriline ava; 160 on objektiivi silindri pikkus (mm); 0,17 on katteklaasi standardpaksus (mm) ). 10x objektiivi efektiivne töökaugus on 6,5 mm ja 40x objektiivi efektiivne töökaugus on 0,48 mm.
3. Objektiivi funktsioon on näidise esmakordne suurendamine ja see on kõige olulisem osa, mis määrab mikroskoobi jõudluse – eraldusvõime.
Eraldusvõimet nimetatakse ka eraldusvõimeks või eraldusvõimeks. Eraldusvõime suurust väljendatakse eraldusvõime kauguse väärtusega (minimaalne kaugus kahe objekti punkti vahel, mida saab lahendada). Fotoopilisel kaugusel (25 cm) näevad normaalsed inimese silmad selgelt kahte objekti punkti, mis on üksteisest 0.073 mm kaugusel. Väärtus 0,073 mm on normaalsete inimsilmade eraldusvõime kaugus. Mida väiksem on mikroskoobi eraldusvõime kaugus, seda suurem on selle eraldusvõime ja seda parem on selle jõudlus.
Mikroskoobi eraldusvõime suuruse määrab objektiivi eraldusvõime ning objektiivi eraldusvõime määrab selle numbriline ava ja valgustusvalguse lainepikkus.
Tavalise keskvalgustuse meetodi (fotoopilise valgustuse meetod, mis võimaldab valgusel proovi ühtlaselt läbida) kasutamisel on mikroskoobi eraldusvõime kaugus d=0.61λ/NA
Valemis d——objektiivi eraldusvõime kaugus, nm.
λ – valgustusvalguse lainepikkus, ühik nm.
NA – objektiivi numbriline ava
Näiteks õlikümblusobjektiivi objektiivi numbriline ava on 1,25 ja nähtava valguse lainepikkuste vahemik on 400-700nm. Kui keskmine lainepikkus on 550 nm, siis d=270 nm, mis on umbes pool valgustusvalguse lainepikkusest. Üldjuhul on nähtava valgusega valgustatud mikroskoopide eraldusvõime piir 0,2 μm.
