Valgusmikroskoobi kujutise optilise teesüsteemi reguleerimine ja mikroskoopilise uuringu kontuurid
Pildistamise optilise tee süsteemi ja mikroskoopilise uurimise kontuuri reguleerimine
Mikroskoobi kujutise optilise süsteemi reguleerimine toimub vastavalt erinevate mikroskoopiatehnikate vajadustele. Nn mikroskoopia on lühidalt öeldes valgustusmeetod, mida kasutatakse proovi mikroskoobiga vaatlemisel, ning tehnika ja meetod proovist moodustatud kujutise parema kontrasti saamiseks. Järgnevalt kirjeldatakse lühidalt, et mikroskoopia on küpsenud mitmel meetodil ja vastavat mikroskoobi kujutise optilise süsteemi reguleerimismeetodit.
1. Edastamise hele väli:
See on kõige traditsioonilisem ja levinum rakendusmeetod alates mikroskoobi leiutamisest. Põhikomponendid: a. Objektiiv: ereda välja vaatlemiseks saab kasutada mis tahes objektiivi; b. Objektiiv: kasutada võib igasuguseid sihikuid, eelistatavalt varustatud avadiafragmaga. Reguleerimismeetod: pärast ülaltoodud mikroskoobi Kuhleri valgustussüsteemi reguleerimist saab rakendada ereda välja meetodit. Kasutusala: kõik määrdunud koelõigud, vereproovid jne. Ettevaatusabinõud: a. Ereda väljaga vaatlusmeetodi kasutamisel tuleb reguleerida Kuhleri valgustussüsteemi; b. Vaatevälja diafragmat ei tohiks meelevaldselt avada ning kondensaatorpeegli esilääts peaks olema asetatud faktiliselt väljapoole ja vastavalt optilisele teele, kui kasutatakse objektiivi 10×, alla 10× ja rohkem kui 10 ×; c. Kondensaatori peegli ava diafragmat ei tohiks kasutada vaatevälja heleduse reguleerimiseks ja kondensaatorpeegli kõrgust ei tohiks valimatult reguleerida, vastasel juhul vähendatakse mikroskoobi eraldusvõimet ja värvitud koe eraldusvõimet. saab kahjustada. mikroskoobi ja kahjustuste eraldusvõime on kohandatud Kuhleri valgustussüsteemile; d. Mikrograafide puhul peate iga objektiivi suurenduse kasutamise muudatuse korral reguleerima kondensaatorläätse ava diafragmat nii, et selle suurus oleks täpselt võrdne objektiivil kasutatava numbrilise avaga 2/3.
2. Läbiva valgusfaasi kontrasti meetod:
See on kontrasti suurendamise meetodi kaasaegne mikroskoobi uuring. Põhikomponendid: faasikontrastsusega objektiiv, ere vaateväli ja faasikontrastsusega mitmeotstarbeline täpistik, teravustamisteleskoop, rohelised filtrid.
Reguleerimismeetodid:
a. Kuhleri valgustussüsteemi reguleerimise põhjal teravustage proov ereda välja meetodi abil selgelt
b. Keerake skaalal skaala asendisse Ph1, valige 10 × faasikontrastsusega objektiiv ja asendage vaadeldav läbipaistev näidis.
c. Ühendage üks okulaaridest lahti, asendage see tsentreeritud teleskoobiga ja keskenduge kahele vaateväljas olevale faasikontrastrõngale (objektiivi must faasikontrastrõngas ja kondensaatorläätse valguse läbilaskefaasi kontrastrõngas).
d. Vaateväljas olevad kaks faasikontrastrõngast ei pruugi tingimata kokku langeda, reguleerige täpimõõturi kahte reguleerimisseadet (reguleerige faasikontrastrõnga reguleerimishoova vasakut ja paremat asendit ning reguleerige hõõrdnupu eesmist ja tagumist asendit) , nii et esi- ja tagakülje valgusülekande rõngas paremale ja vasakule langeb kokku musta rõngaga
e. Pärast reguleerimist lülitage vaatluseks tagasi okulaarile ja vajutage roheline filter optilisele teele, et jälgida proovi faasikontrastpilti.
f. Kui vaatluseks on 20× ja 40× objektiivid, tuleks täpplääts seada asendisse Ph2 ja 100 objektiivi kasutamisel tuleks täpplääts seada asendisse Ph3.
Kasutusala: see sobib läbipaistvate, värvimata või värvitute proovide, näiteks igasuguste rakkude, eluskudede, värvimata või värvimata koelõikude, veeorganismide jms vaatlemiseks.
3. Diferentsiaalse interferentsi faasikontrastsuse meetod:
Et ületada faasikontrastsuse meetodit, mille abil vaadeldakse kujutist ümbritsevaid näidise detaile koos haloga, varjatakse välja detailid, mida oleks pidanud nägema, samuti vajavad proovid või koelõigud üsna õhukest paksust, põhimõtteliselt võib olema paksem kui 10 m ja muud piirangud, kahekiireliste häirete põhimõtte kasutamine alamdiferentsiaalse interferentsi faasikontrastsuse meetodi kujundamisel.
Reguleerimismeetodid:
a. DIC-meetodit tuleb kohandada selle alusel, et Kulemini süsteem on juba kohandatud
b. Määrake 10-kordse objektiivi abil objektiivi teravustamisasend, mis näeb näidist ereda vaateväljaga selgelt.
c. Asetage polarisaator valgustusrajale, pannes tähele, et see peaks olema orienteeritud ida-lääne suunas.
d. Keerake kondensaatori ketas asendisse, mis vastab 10 × objektiivi kasutamisele, st DIC 0.3-0.4.
e. Sisestage 10-kordse objektiivi DIC-liugur objektiivi tagaossa või objektiivimuundurisse.
f. Sisestage analüsaator pildistamise optilisse teekonda ja pange tähele, et selle suund peaks olema lõuna-põhja suunas.
g. Asendage vaadeldav läbipaistev proov, näidise selgeks teravustamiseks lülitage valgusallikas sisse.
h. Reguleerige DIC-i sisestust nii, et diferentsiaalhäirete kontrastsusega kujutis saavutaks parima efekti, st kõige ilmsema reljeefse efekti.
i. Samal ajal reguleerige kondensaatorpeegli ava diafragmat, et kontrasti mõju oleks samuti optimaalne.
j. Seejärel viimistlege valimi üksikasju, et näha valimi struktuuri erinevatel tasanditel.
k. Kui lisavärv (esimese järgu punane aeglustusplaat) sisestada ja samal ajal reguleerida DIC-i, on vaateväljas näha pidevalt muutuvaid säravaid värve punase, oranži, kollase, rohelise, sinise, lilla, roosa, roosa-violetne ja kuldkollane. Kasutusala: läbipaistvad või värvimatud koelõigud, paksus kuni umbes 100 μm, eluskuded ja elusrakud kultuuris, väikesed elusorganismid ja nii edasi.
